凝胶迁移或电泳迁移率(EMSA) 原理 凝胶迁移或电泳迁移率实验(EMSA)是一种研究DNA结合蛋白和其相关的DNA结合序列相互作用的技术,可用于定性和定量分析。这一技术最初用于研究DNA结合蛋白,目前已用于研究RNA结合蛋白和特定的RNA序列的相互作用。通常将纯化的蛋白和细胞粗提液和32P同位素标记的DNA或RNA探针一同保温,在非变性的聚丙烯凝胶电泳上,分离复合物和非结合的探针。DNA-复合物或RNA-复合物比非结合的探针移动得慢。同位素标记的探针依研究的结

电镜透射电镜实验技术透射电子显微镜结构和成像原理透射电子显微镜结构包括两大部分:主体部分为照明系统、成像系统和观察照相室;辅助部分为真空系统和电气系统。透射电镜的应用透射电子显微镜在材料科学、生物学上应用较多。由于电子易散射或被物体吸收,故穿透力低,样品的密度、厚度等都会影响到最后的成像质量,必须制备更薄的超薄切片,通常为50～100nm。所以用透射电子显微镜观察时的样品需要处理得很薄。常用的方法超薄切片法、冷冻

在生物遗传信息传递的过程中,中心法则是所有有细胞结构的生物所遵循的法则,其核心内容是指遗传信息从DNA传递给RNA,再从RNA传递给蛋白质,即完成遗传信息转录和翻译的过程。在该过程中,RNA起到了承上启下的作用,本文就RNA的种类作一汇总,以便更好地加以区分。图1:遗传信息传递的中心法则细胞中仅有少数转录生成的RNAs可作为蛋白质合成的模板,称为编码RNA(coding RNA),主要包括mRNA,其余的RNA则被称为非编码RNA(non-coding RNA, ncRNA),这是RNA的两大类。而根据RNA

救救孩子吧 想问一下连接酶链反应到底什么意思啊？第一轮变性后靶DNA是脱落了吗？为啥它的数量不变

如果siRNA的效率为负数，比如-70%（促进DNA翻译这种siRNA还是有效的吗？

免疫细胞是人体免疫应答的重要参与者,同时还是免疫功能的执行者。广义的免疫细胞一般指参与免疫应答和免疫效应的所有细胞。免疫细胞包括T淋巴细胞、B淋巴细胞、NK细胞、单核巨噬细胞、中性粒细胞、嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞红细胞和血小板。其中,T淋巴细胞和B淋巴细胞,是免疫应答中最活跃和最重要的免疫细胞,所以,这两种细胞又称为免疫活性细胞。 流式细胞术检测免疫细胞的原理与一般常规免疫检测相似,也是通过抗体与细胞中蛋白的特

如果克隆引物当成荧光定量引物使用会发生什么

求吕俊鸟老师分子生物学课程视频

长片段扩增不出来，10000bp左右，打算连接在EGFP载体上，也不好连接

想知道RNA的再编码是作为一种应对修复的机制存在，还是一种主动增加蛋白质种类的机制？

为什么质粒转农杆菌需要在液氮下几分钟？

产品特点 ◎基因工程改造的逆转录酶，具有较高的热稳定性，即使在摄氏50多度时也有较好的逆转录表现； ◎可有效克服RNA模板二级结构的影响，对于具有二级结构的RNA模板也能获得理想的实验结果； ◎对RNA模板具有更高的亲和力，可检测到低至1pg总RNA中的目标片段，特别适合于总RNA量较少以及目标RNA拷贝数较低情况下的逆转录。 产品介绍 BIOG Super Reverse Transcriptase是公司美国团队在西雅图的实验室研发出的一款具有卓越性能的逆转录酶。利用基因

做为科研领域的人，没有谁不知道PCR。它是一种用于放大扩增特定的DNA片段的分子生物学技术，可看作是生物体外的特殊DNA复制，PCR的最大特点是能将微量的DNA大幅增加。 这个由美国科学家Mullis在1985年发明的聚合酶链反应，至今在世界范围内都有广泛的应用，作为生物学实验的一个重要的方法，其有着不可估量的作用。 什么是定量PCR？ 我们知道，DNA有着双螺旋结构，当温度达到95摄氏度时，双链的DNA会分解成为单链状态，而在温度到达72摄氏度左右

我在b站上浅学了一下，感觉还是不会，只能找地方求助，希望会的大佬指点迷津！

问一下大神们，这是我近期跑的一张pcr产物胶图，为什么堵在了孔上跑不出去？

求助求助急急急急急!!!!!

今年9月，小骨我有幸从考研大军中突围而出，成为了长留上仙白子画的弟子。如今研一即将结束，我马上要进入自己的课题研究。师傅说他利用 “转录组测序”技能，在万千众生中发现了一个名叫“Perfect”的基因，可能会让水稻分蘖更多，籽粒更大，产量更高。他老人家想让我研究这个“Perfect”基因的功能，到底是不是真的能让水稻分蘖增多，籽粒变大，产量提高。可是，小骨我完全没有思路，请各位大侠赐教？ 请根据所学知识帮助小骨设计研究

都说房祖名和老爸成龙特别像,尤其是鼻子。最近，来自火星的科学家NASA发布了一个重大发现:NOSE基 因对鼻子的形状有非常重要的作用。房祖名和成龙的鼻子之所以相像，很可能是NOSE基因的表达所致。 请根据所学的“遗传信息传递”相关知识，阐述成龙的NOSE基因是如何通过DNA复制传递给房祖名，二人基因组中的NOSE基因是如何进行表达的。-

星星草，是一种优质牧草，与其它牧草相比，耐盐碱能力极强。经过多年研究发现星星草基因组中zzzz有一个SALT基因，在盐碱胁迫下表达量会急剧增加，从而使细胞将体内多余的离子排出体外。请根据所学的“基因表达调控”相关知识，阐述SALT基因表达增加的可能原因（提示：从转录前、转录、转录后、翻译及翻译后等水平进行阐述）。

RNA免疫共沉淀(RNA Immunoprecipitation,RIP )是研究细胞内RNA与蛋白结合情况的技术,是了解转录后调控网络动态过程的有力工具,能帮助我们发现miRNA的调节靶点。 RIP这种技术运用针对目标蛋白的抗体把相应的RNA-蛋白复合物沉淀下来,然后经过分离纯化获得结合在复合物上的RNA,再通过高通量测序实现对目的RNA的信息分析。RIP技术与高通量测序的结合,能帮助研究人员更好的了解癌症以及其它疾病整体水平的RNA变化。 样本要求 • 样品类型:RIP分离的RNA样品 • 样品

请问基因的碱基质量换算系数是多少，怎么计算得来的?

我们在做大肠杆菌基因组DNA提取的时候，做到第六步加氯气—异戊醇，然后进行一万转每分钟离心5min，结果没有出现分层，这是为什么啊，求问大佬

转染是指将外源基因导入细胞内的一种生物学技术。转染可分为物理介导、化学介导和生物介导三类途径。物理介导方法有电穿孔法、显微注射和基因枪法,化学介导方法很多,如磷酸钙共沉淀法、脂质体转染方法、和多种阳离子物质介导技术,生物介导方法,有较为原始的原生质体转染,和现在比较多见的各种病毒介导的转染技术。 病毒载体是以病毒为基础进行改造而获得的载体,已经成为目前最常用的转染方式之一。通过对病毒基因组进行改造,能够使其

如题，我的数据已经回来了，也做了差异性分析，后面不知道怎么办了，ps 不会使用R语言

Small-interfering RNAs,是一种21-25bp的短干扰RNA。这种RNA可以通过同源互补序列的mRNA为靶目标使特定的mRNA高效特异性降解的现象,因此又被称为RNA干扰(RNAi)。RNAi的应用包括功能基因组学,药物靶筛选,细胞信号传导通路分析等。 siRNA与蛋白组装成诱导沉默复合物(RNA-induced silencing complex,RISC)(一种由siRNA与Argonaute蛋白和Dicer酶复合形成的复合物),然后RISC识别靶位点,剪切并降解mRNA实现转录后水平的基因沉默。 目前为止制备siRNAs的方法主要包括化学合成、体外转录、

南京大学现代工程与应用科学学院宁兴海课题组招聘博士后 合作导师：宁兴海，南京大学现代工程与应用科学学院博士生导师，中组部青年千人 曾以主要完成人身份在Nature Materials、Science Advances、Journal of the American College of Cardiology、Angewandte Chemie、Advanced Materials、Biomaterials等杂志上发表多篇研究论文，目前共发表论文>40篇，引用次数约2000次。同时，申请中国、美国及世界专利二十多项，其中部分专利产品已被世界最大的生物技术公司之一的Life techno

出现这种情况的原因是什么呢？最左边的是marker2000bp的，想不明白。求解答。

两组质粒，都是同一个质粒用来酶切，左边是对照的质粒，右边是单酶切后的质粒，搞不明白，老师一直在说是酶污染了什么什么污染了，但是我觉得是质粒的问题#质粒#

MDL分子生物学实验平台拥有实时荧光定量PCR系统、多功能荧光检测系统、核酸电泳系统、核酸纯化仪、分子杂交箱等多种仪器，为基因诊断、文库建立、基因组研究、大数据分析等提供良好的支撑。可以完成目的基因的ORF分析，基因扩增；PCR产物的纯化和连接转化，克隆载体和表达载体的构建；目的基因的调控功能和酶活性分析等实验。 荧光定量PCR检测技术还可完成对淋球菌、沙眼衣原体、解脲支原体、人类乳头瘤病毒、单纯疱疹病毒、人类免疫缺

人体必需氨基酸,指人体不能合成或合成速度远不适应机体的需要,必须由食物蛋白供给,这些氨基酸称为必需氨基酸。共有赖氨酸(Lysine )、色氨酸(Tryptophan)、苯丙氨酸(Phenylalanine)、甲硫氨酸(Methionine)、苏氨酸(Threonine)、异亮氨酸(Isoleucine )、亮氨酸(Leucine )、缬氨酸(Valine)8种。 生物体三大营养物质之一,蛋白质的基本组成单位。常见的约20种。生物体内的游离氨基酸在包括临床诊断、各种生命活动和生理作用中起重要作用。因此,氨基酸的检测分析在各种生物

心肌缺血和心肌梗塞模型 制动物心肌缺血和心肌梗塞模型的方法有结扎冠状动脉法,有的结扎左旋冠脉,但多数是结扎左前降冠脉,鉴于结扎冠状动脉主干死亡率高,故亦有使用多处结扎的方法,即同时结扎几处的冠脉分支,以形成一个梗死区域。经验证明,结扎的冠状动脉,因其分布的心肌范围和该区内是否有其他冠状动脉,而决定着心肌梗塞的面积,结扎方法是建立很早而至今还普通使用的方法。此外,还有用油质、石松子孢或汞等作弥散性冠状动脉微栓塞或选

有没有大神知道这样的结果是怎么回事啊？两边特别黑的是marker，我的目的蛋白在组织中本来是高表达的，结果几乎没有条带，是不是一抗的问题啊，怎么跟marker结合了呢？

简介: 梅尼埃病(Ménières disease)是一种特发性内耳疾病,在1861年由法国医师Prosper Ménière首次提出。该病主要的病理改变为膜迷路积水,临床表现为反复发作的旋转性眩晕、波动性听力下降、耳鸣和耳闷胀感。本病多发生于30～50岁的中、青年人,儿童少见。男女发病无明显差别。双耳患病者约占10%～50%。目前已知的病因包括以下因素:各种感染因素(细菌、病毒等)、损伤(包括机械性损伤或声损伤)、耳硬化症、梅毒、遗传因素、过敏、肿瘤、白血病及自身免

本人研究毕赤酵母，想找毕赤酵母内有没有我想要的一个蛋白，我需要去哪找你，已经纠结了好久好久，求助各位大佬们

用NEB的网页设计的引物，买的酶，连接酶用的诺唯赞的，但是总是长不出克隆或者错连#goden gate#

有师兄师姐构建标签重组病毒吗？我总是构建不上，想问下

简介: 梅尼埃病(Ménières disease)是一种特发性内耳疾病,在1861年由法国医师Prosper Ménière首次提出。该病主要的病理改变为膜迷路积水,临床表现为反复发作的旋转性眩晕、波动性听力下降、耳鸣和耳闷胀感。本病多发生于30～50岁的中、青年人,儿童少见。男女发病无明显差别。双耳患病者约占10%～50%。目前已知的病因包括以下因素:各种感染因素(细菌、病毒等)、损伤(包括机械性损伤或声损伤)、耳硬化症、梅毒、遗传因素、过敏、肿瘤、白血病及自身免

有没有做转录组通路分析的？有偿急急急

如果将质粒载体转化目的菌株来进行基因编辑，但是如果这个质粒可以在目的菌株中复制，这个质粒载体就不可以在这个菌株中来进行基因编辑，所以我现在的问题是如何设计引物来验证这个质粒是否在目的菌株中复制?

物理化学都学得懂，为啥学生物感觉云里雾里的

RNasea是不是RNA酶？

抑郁是一种以情绪低落,思维迟钝,行为迟缓为主要症状的精神疾病,同时可伴有睡眠减少,体重降低等躯体症状。 模型制作 慢性温和的不可预知性应激(chronicmildstress,CMS)由Katz等 于1981年创立,但缺点较多,如过强的 应激刺激常导致动物死亡。由Willner等对其进行改进,是目前应用和研究较多的一种抑郁症模型。让大鼠在2~4周内每天经历一种不愉快的轻度应激,包括冷水游泳(4℃,5min),电击(电流强度1.0mA,频率1次/分),热环境(45℃,5min),日夜颠倒,闪光刺激(频率3次/分),

采用“水上转盘法”建立大鼠全睡眠剥夺模型。本方法一是剥夺动物全部睡眠的方法,根据实验动物怕水的习性设计而成。剥夺装置主要由剥夺箱、转盘及转盘相连接的动力装置三部分组成。箱内盛水,转盘基座与箱底连接,周围注水,转盘高出水面,动物放在转盘上后,匀速转动。由于动物子啊睡眠状态时肌张力降低,离心作用使其掉入水中而惊醒,为避免掉入水中,动物必须不停活动,从而达到剥夺睡眠的目的。 模型制作方法: SD大鼠,体重140-150g,雄性。睡眠剥

偏头痛是一类有家族发病倾向的周期性发作疾病。表现为发作性的偏侧搏动性头痛,伴恶心及呕吐等,经一段歇期后再次发病。在安静、黑暗环境内或睡眠后头痛缓解。在头痛发生前或发作时可伴有神经、精神功能障碍。 颅内存在头疼敏感组织如大的脑血管、硬脑膜、软脑膜血管、静脉窦,其血管周围的神经纤维源自三叉神经节,当供应硬脑膜及脑血管壁上的三叉神经纤维末梢受到电刺激时,血管活性肽类物质可以被释放出来,其具有强烈的扩张血管及致头

刚接触分子生物学不久，要做vigs，要把三个同源拷贝的基因都沉默掉，现在设计引物，我怎么设计呀，特异性比对也都不太行，了解的一个siRNAfinder但是下载不了，找到的序列也不知道怎么办，师姐说要找一个网站先预测下我也不明白，希望有人帮帮我

lewis肺癌自发肺转移模型实验原理 Lewis肺癌为一株恶性程度较高的自发性肺内未分化上皮样癌,受体鼠为C57BL/6。移植瘤主要通过血行散播在肺部形成转移灶。移植于皮下、肌肉或者足趾等特定部位,移植瘤增殖形成原位瘤,若给予一定剂量的有抗癌活性的药物,则可抑制肿瘤在体内的生长。随后肿瘤细胞开始侵袭周围的正常组织和血管,继之癌细胞进入血液循环转运至靶器官,粘附于血管壁上并穿过血管,癌细胞增殖成集落,最后形成转移瘤。上述过程基本类似

精神分裂症是一种严重而复杂的精神疾病,人群发病率高达1%。它的典型症状包括思维障碍、幻觉、错觉和妄想等阳性症状,以及社会退缩、情感淡漠和意志缺乏等阴性症状,这些症状主要涉及注意、记忆、抽象思维、信息整合以及执行功能等认知功能。 如何建立精神分裂症认知障碍的动物模型对于了解精神分裂症的病因学机制、抗精神分裂症药物的作用机理以及新药开发都具有非常重要的意义。而建立精神分裂症的动物模型的一个关键问题是如何通过动