本文对各种潜血显现试剂进行了概述，指出目前常用的潜血显现试剂的显现原理、使用方法和存在的问题，对潜血的显现提供一定的参考。
关键词：潜血，试剂，蓝影，鲁米诺，鲁米星、四甲基联苯胺。
前言
血迹是凶杀、伤害等重大刑事案件中最常见最重要的物证。目前血迹检测法的出发点是对血液中的血红蛋白、蛋白质、氨基酸进行检测。用于检测血红蛋白的试剂有蓝影、四甲基联苯胺、孔雀石绿、鲁米星、鲁米诺、GL荧光潜血试剂等；而对蛋白质及氨基酸可进行检测的有酰胺黑、考马斯亮蓝、茚三酮、邻苯二甲醛、荧光亮红等。蛋白质和氨基酸类检测试剂主要应用于已知潜血痕迹的增强显现，在粗糙面上容易引起背景着色；而对血红蛋白检测的四甲基联苯胺会对DNA造成破坏！鲁米诺发光强度很弱，发光时间也比较短，而对于潜血指印检测来说，需要考虑承受客体表面的复杂环境，还需要保护指印的纹线细节，对于以上这些方法来说就有相当大的难度了。所以非常有必要对潜血显现试剂进行方法和问题总结，以便于在实际案件工作中进行参考，更好地发挥潜血试剂的用途。
一、潜血试剂的显现原理
血迹中存在蛋白质、氨基酸和血红蛋白，目前的潜血显现试剂基本上就是针对以上三种物质进行反应，从而显现出特定的颜色，或再借助其他的设备来检测吸收光、荧光、化学发光情况，实现血迹的发现。
表1：部分潜血试剂及其作用和检测原理
用于蛋白质和氨基酸的试剂 检测方式 用于血红蛋白及其衍生物的试剂 检测方式
氨基黑(别名：酰胺黑，酸性黑) 吸收光 联苯胺 吸收光
考马斯亮蓝 吸收光 四甲基联苯胺 吸收光
茚三酮 吸收光、荧光 蓝影 吸收光
苯(f)茚三酮 吸收光、荧光 孔雀石绿 吸收光
丹磺酰氯 荧光 红汞 吸收光
荧光胺 荧光 酚酞 吸收光
邻苯二甲醛 荧光 鲁米诺 (别名：发光胺) 化学发光
酸性黄 荧光 蓝星（主要成分鲁米诺） 化学发光
iLG荧光亮红 荧光 血叶啉 光致荧光
iLG靶向试剂 荧光 二氯荧光素 光致荧光
GL潜血试剂 光致荧光
以上试剂理论上都可以应用于血迹的显现，但由于试剂的操作方法、毒理特性、显现效果不同，并不是所有的试剂都常应用于实际案件中。
1、蛋白质类试剂
氨基黑、考马斯亮蓝、属于与蛋白质反应的试剂，一般在酸性条件下反应，当试剂接触到蛋白质后，两者之间产生吸附作用直接显色，或者使接触部位的最大吸收峰发生变化从而显现出不同的颜色，比如考马斯亮蓝的最大吸收峰会从465nm变为595nm，从而显现出蓝色。
2、氨基酸类试剂
茚三酮包括苯(f)茚三酮、iLG靶向试剂都是与氨基酸类反应的试剂，当然其也能与蛋白质反应，其反应的本质是与氨基酸上的氨基进行反应，如果蛋白质可以分解成氨基酸，就可以解离出氨基，所以他们与氨基酸的反应效果更好。
3、血红蛋白及其衍生物的试剂
用于血红蛋白的检测方法较为有效，因为蛋白质和氨基酸并不是血液的独有成分。四甲基联苯胺、蓝影、鲁米诺、鲁米星等都是与血红蛋白反应的试剂，该试剂的出发点是把一种无色或稍带颜色的物质用血液中的亚铁血红素催化氧化成一种可以发荧光的或者吸收光很强的染料。
血红蛋白与染料反应原理：
① Fe2+ +H2O2 Fe3+=O+ H2O
血迹中的亚铁发生与类似过氧化氢的反应，形成“氧-铁”中间产物。
② Fe3+=O+ AH2 A + H2O
“氧-铁”中间产物与无色燃料AH2反应生成有色燃料A。
二、常用试剂实际效果
1、蓝影试剂
蓝影试剂是成都龙观飞宇科技有限公司研发的水基潜血显现的试剂，它属于水溶性试剂，安全无毒，没有化学试剂的刺激味道，有淡淡的醇香味，显现后不影响后续DNA检测。因为其对蛋白质有固定作用，所以可以有效防止血迹被试剂分散而冲走。蓝影试剂是偏向淡棕色的，遇到血迹后就会立刻显现出特殊蓝色，并且长久不褪色。与鲁米诺、四甲基联苯胺等显色试剂不同的是，蓝影血液追踪剂的显色直接可见，可见度很高，不需要黑暗的环境；背景不糊，可以显现潜血纹线；只对血液反应，对洗衣液、铁锈等客体不反应，排出了众多假阳性；显色不褪，方便观察拍摄。
图1：白墙上血指纹(只在左半部分喷射蓝影试剂)
2、LumiSTAR鲁米星试剂
鲁米星潜血显现试剂 是与血红蛋白反应的给你试剂，原理与鲁米诺一样，它遇到潜血会立即发出肉眼可见的高亮度持久绿光，不受客体颜色的影响，尤其针对深色表面的，微量的潜血痕迹；可对凶杀、伤害等重大刑事案件现场的潜血进行快速搜索定位，是潜血发现必备的产品。相比于鲁米诺类试剂，具有发光亮度高、持续时间长、灵敏度高、试剂稳定的特点！
图2：发光灵敏度：上：鲁米诺试剂、下：鲁米星试剂
3、GL荧光潜血试剂
国内首款能应用于现场血迹搜寻的光致荧光试剂。试剂本身无荧光，当试剂接触到血液后会立即产生荧光物质，荧光持续存在，用于背景荧光较浅或无背景荧光的客体，采用蓝光激发，因而不受环境光线影响，能显现稀释10万倍以上的血迹。试剂接触血迹后，荧光随反应会越来越亮，因而对陈旧血迹也具有非常好的显现效果！
图3：GL荧光潜血试剂显现潜血前后效果
4、氨基黑和iLG荧光亮红试剂
氨基黑：直接染色
分为固定液、氨基黑染色剂、漂洗液。以上溶液配制完成后均可长期保存 ,但由于氨基黑可能有沉淀出现 ,故使用前需再次搅拌至溶解。氨基黑呈蓝黑色粉末状固体,溶于有机溶剂,对人体有一定危害，操作过程注意保持通风。显现完成后，血迹部分呈现黑色(考马斯亮蓝为蓝色，且灵敏度比氨基黑高80%)，所以只适合对浅色客体进行显现。
图4：白色瓷杯上的血指纹
iLG荧光亮红试剂：染色+荧光
iLG荧光亮红试剂也分为固定液、染色剂、漂洗液，与氨基黑不同的是，显色后的血迹在自然光下具有很高的可见度，同时在绿光下又具有独特的红色荧光，可以排除众多可见光干扰；适用从浅色到深色的各种光滑客体表面，iLG荧光亮红血印试剂的另一个特点是染色后的痕迹可以通过指纹提取胶片提取转移，所以在强背景荧光的客体上也可以使用
图5：左：潜血指纹、中：iLG试剂显色后效果、右：iLG显色后荧光效果
5、
四甲基联苯胺
四甲基联苯胺是替换致癌显色剂--联苯胺而开发的一种试剂，需要配置显现液和反应液。使用时将两者混合，混合后的试剂需要立刻使用以保证试剂有效。其反应原理与鲁米诺类似，但反应后的结果不是化学发光，而是反应物通过吸收光呈现出青色色。它具有与鲁米诺相似的假阳性，而且由于其显色较深，只适合浅色客体的显现，长时间后背景色比较严重。
图6：四甲基联苯胺显现滤纸上的稀释血
总结
通过对常用潜血试剂进行对比发现，案件现场复杂，单一的试剂无法解决所有的潜血显现，针对不同的场景需要不同的试剂显现。鲁米星由于客体的颜色对显现无影响，发光时间长，亮度高，可用于案件现场的潜血快速搜寻，是潜血发现的必备产品；而蓝影试剂安全无毒，可以显现血指纹，也不破坏DNA，是除深色客体外优选的潜血显现产品；如果希望对血迹进行长时间的显现观察，特别是深色的客体，可以采用GL荧光潜血试剂，而对血指纹的显现可以采用iLG荧光亮红试剂。
参考文献：
[1] 程京，易旻，杨其华. 激光指纹术. 清华大学出版社. 2005(05)
[2] 聂惠延，陈维祜. 血潜手印的显现提取探讨[J].法制与经济(中旬).2014(06)
[3] 郭和国. 四甲基联苯胺重复显现血手印的影响因素[J].刑事技术. 2002(03)
[4] 王忱. 考马斯亮蓝与四甲基联苯胺显现血手印的比较研究[J].科技创新导报. 2015(20)
[5] 严安心.蓝影试剂在法医血痕DNA 检验中的适用性[J].刑事技术.2022(0)
关键词：潜血，试剂，蓝影，鲁米诺，鲁米星、四甲基联苯胺。
前言
血迹是凶杀、伤害等重大刑事案件中最常见最重要的物证。目前血迹检测法的出发点是对血液中的血红蛋白、蛋白质、氨基酸进行检测。用于检测血红蛋白的试剂有蓝影、四甲基联苯胺、孔雀石绿、鲁米星、鲁米诺、GL荧光潜血试剂等；而对蛋白质及氨基酸可进行检测的有酰胺黑、考马斯亮蓝、茚三酮、邻苯二甲醛、荧光亮红等。蛋白质和氨基酸类检测试剂主要应用于已知潜血痕迹的增强显现，在粗糙面上容易引起背景着色；而对血红蛋白检测的四甲基联苯胺会对DNA造成破坏！鲁米诺发光强度很弱，发光时间也比较短，而对于潜血指印检测来说，需要考虑承受客体表面的复杂环境，还需要保护指印的纹线细节，对于以上这些方法来说就有相当大的难度了。所以非常有必要对潜血显现试剂进行方法和问题总结，以便于在实际案件工作中进行参考，更好地发挥潜血试剂的用途。
一、潜血试剂的显现原理
血迹中存在蛋白质、氨基酸和血红蛋白，目前的潜血显现试剂基本上就是针对以上三种物质进行反应，从而显现出特定的颜色，或再借助其他的设备来检测吸收光、荧光、化学发光情况，实现血迹的发现。
表1：部分潜血试剂及其作用和检测原理
用于蛋白质和氨基酸的试剂 检测方式 用于血红蛋白及其衍生物的试剂 检测方式
氨基黑(别名：酰胺黑，酸性黑) 吸收光 联苯胺 吸收光
考马斯亮蓝 吸收光 四甲基联苯胺 吸收光
茚三酮 吸收光、荧光 蓝影 吸收光
苯(f)茚三酮 吸收光、荧光 孔雀石绿 吸收光
丹磺酰氯 荧光 红汞 吸收光
荧光胺 荧光 酚酞 吸收光
邻苯二甲醛 荧光 鲁米诺 (别名：发光胺) 化学发光
酸性黄 荧光 蓝星（主要成分鲁米诺） 化学发光
iLG荧光亮红 荧光 血叶啉 光致荧光
iLG靶向试剂 荧光 二氯荧光素 光致荧光
GL潜血试剂 光致荧光
以上试剂理论上都可以应用于血迹的显现，但由于试剂的操作方法、毒理特性、显现效果不同，并不是所有的试剂都常应用于实际案件中。
1、蛋白质类试剂
氨基黑、考马斯亮蓝、属于与蛋白质反应的试剂，一般在酸性条件下反应，当试剂接触到蛋白质后，两者之间产生吸附作用直接显色，或者使接触部位的最大吸收峰发生变化从而显现出不同的颜色，比如考马斯亮蓝的最大吸收峰会从465nm变为595nm，从而显现出蓝色。
2、氨基酸类试剂
茚三酮包括苯(f)茚三酮、iLG靶向试剂都是与氨基酸类反应的试剂，当然其也能与蛋白质反应，其反应的本质是与氨基酸上的氨基进行反应，如果蛋白质可以分解成氨基酸，就可以解离出氨基，所以他们与氨基酸的反应效果更好。
3、血红蛋白及其衍生物的试剂
用于血红蛋白的检测方法较为有效，因为蛋白质和氨基酸并不是血液的独有成分。四甲基联苯胺、蓝影、鲁米诺、鲁米星等都是与血红蛋白反应的试剂，该试剂的出发点是把一种无色或稍带颜色的物质用血液中的亚铁血红素催化氧化成一种可以发荧光的或者吸收光很强的染料。
血红蛋白与染料反应原理：
① Fe2+ +H2O2 Fe3+=O+ H2O
血迹中的亚铁发生与类似过氧化氢的反应，形成“氧-铁”中间产物。
② Fe3+=O+ AH2 A + H2O
“氧-铁”中间产物与无色燃料AH2反应生成有色燃料A。
二、常用试剂实际效果
1、蓝影试剂
蓝影试剂是成都龙观飞宇科技有限公司研发的水基潜血显现的试剂，它属于水溶性试剂，安全无毒，没有化学试剂的刺激味道，有淡淡的醇香味，显现后不影响后续DNA检测。因为其对蛋白质有固定作用，所以可以有效防止血迹被试剂分散而冲走。蓝影试剂是偏向淡棕色的，遇到血迹后就会立刻显现出特殊蓝色，并且长久不褪色。与鲁米诺、四甲基联苯胺等显色试剂不同的是，蓝影血液追踪剂的显色直接可见，可见度很高，不需要黑暗的环境；背景不糊，可以显现潜血纹线；只对血液反应，对洗衣液、铁锈等客体不反应，排出了众多假阳性；显色不褪，方便观察拍摄。
图1：白墙上血指纹(只在左半部分喷射蓝影试剂)
2、LumiSTAR鲁米星试剂
鲁米星潜血显现试剂 是与血红蛋白反应的给你试剂，原理与鲁米诺一样，它遇到潜血会立即发出肉眼可见的高亮度持久绿光，不受客体颜色的影响，尤其针对深色表面的，微量的潜血痕迹；可对凶杀、伤害等重大刑事案件现场的潜血进行快速搜索定位，是潜血发现必备的产品。相比于鲁米诺类试剂，具有发光亮度高、持续时间长、灵敏度高、试剂稳定的特点！
图2：发光灵敏度：上：鲁米诺试剂、下：鲁米星试剂
3、GL荧光潜血试剂
国内首款能应用于现场血迹搜寻的光致荧光试剂。试剂本身无荧光，当试剂接触到血液后会立即产生荧光物质，荧光持续存在，用于背景荧光较浅或无背景荧光的客体，采用蓝光激发，因而不受环境光线影响，能显现稀释10万倍以上的血迹。试剂接触血迹后，荧光随反应会越来越亮，因而对陈旧血迹也具有非常好的显现效果！
图3：GL荧光潜血试剂显现潜血前后效果
4、氨基黑和iLG荧光亮红试剂
氨基黑：直接染色
分为固定液、氨基黑染色剂、漂洗液。以上溶液配制完成后均可长期保存 ,但由于氨基黑可能有沉淀出现 ,故使用前需再次搅拌至溶解。氨基黑呈蓝黑色粉末状固体,溶于有机溶剂,对人体有一定危害，操作过程注意保持通风。显现完成后，血迹部分呈现黑色(考马斯亮蓝为蓝色，且灵敏度比氨基黑高80%)，所以只适合对浅色客体进行显现。
图4：白色瓷杯上的血指纹
iLG荧光亮红试剂：染色+荧光
iLG荧光亮红试剂也分为固定液、染色剂、漂洗液，与氨基黑不同的是，显色后的血迹在自然光下具有很高的可见度，同时在绿光下又具有独特的红色荧光，可以排除众多可见光干扰；适用从浅色到深色的各种光滑客体表面，iLG荧光亮红血印试剂的另一个特点是染色后的痕迹可以通过指纹提取胶片提取转移，所以在强背景荧光的客体上也可以使用
图5：左：潜血指纹、中：iLG试剂显色后效果、右：iLG显色后荧光效果
5、
四甲基联苯胺
四甲基联苯胺是替换致癌显色剂--联苯胺而开发的一种试剂，需要配置显现液和反应液。使用时将两者混合，混合后的试剂需要立刻使用以保证试剂有效。其反应原理与鲁米诺类似，但反应后的结果不是化学发光，而是反应物通过吸收光呈现出青色色。它具有与鲁米诺相似的假阳性，而且由于其显色较深，只适合浅色客体的显现，长时间后背景色比较严重。
图6：四甲基联苯胺显现滤纸上的稀释血
总结
通过对常用潜血试剂进行对比发现，案件现场复杂，单一的试剂无法解决所有的潜血显现，针对不同的场景需要不同的试剂显现。鲁米星由于客体的颜色对显现无影响，发光时间长，亮度高，可用于案件现场的潜血快速搜寻，是潜血发现的必备产品；而蓝影试剂安全无毒，可以显现血指纹，也不破坏DNA，是除深色客体外优选的潜血显现产品；如果希望对血迹进行长时间的显现观察，特别是深色的客体，可以采用GL荧光潜血试剂，而对血指纹的显现可以采用iLG荧光亮红试剂。
参考文献：
[1] 程京，易旻，杨其华. 激光指纹术. 清华大学出版社. 2005(05)
[2] 聂惠延，陈维祜. 血潜手印的显现提取探讨[J].法制与经济(中旬).2014(06)
[3] 郭和国. 四甲基联苯胺重复显现血手印的影响因素[J].刑事技术. 2002(03)
[4] 王忱. 考马斯亮蓝与四甲基联苯胺显现血手印的比较研究[J].科技创新导报. 2015(20)
[5] 严安心.蓝影试剂在法医血痕DNA 检验中的适用性[J].刑事技术.2022(0)
