游戏中总共有47个 Boss，Boss是空洞骑士游戏中一类特殊的敌人，与普通敌人相比血量较高，攻击更猛烈。小骑士击败 Boss 后可以进入新的区域，获得物品，完成任务，或推进游戏的流程。
一、常见的boss：水晶守卫、假骑士、螳螂领主、破碎容器、诺斯克、辐光、伟大的左特等。
二、战士之梦：战士之梦是那些特别强大的虫子仍在世间徘徊的鬼魂，是一种形式特殊的 Boss，有胡长老、加利安、戈布、马科斯等。
三、变体boss：Boss 的变体会比原先更具挑战性。一些在原先的战斗结束后能在圣巢中与之战斗，一些只能在神居中挑战，另一些是梦境 Boss。有岗哨大黄蜂、暴怒守卫、无上辐光等。
四、梦境boss：大部分梦境 Boss 由杀死特定的 Boss 解锁，用梦之钉击中他们的尸体，就会把小骑士传送进梦境，挑战它们的鬼魂。相比原本的形态，梦境 Boss 具有更快的速度、更复杂的攻击模式以及更高的血量。有梦魇之王格林、灵魂暴君、灰色王子左特等。