在NADH的存在下，测定中提供的还原酶会还原荧光素原还原酶底物以形成荧光素。荧光素使用Ultra-Glo™重组荧光素酶（荧光素检测试剂的组成部分）进行定量，所产生的光信号与样品中NAD +或NADH的量成正比。
检测是特异性和选择性的。

通过包括NAD或NADP循环酶和NAD或NADP循环底物分别选择性地测量未磷酸化和磷酸化的核苷酸，可赋予NAD / NADH-Glo™和NADP / NADPH-Glo™检测反应特异性。提供了附件协议，以允许分别测量NAD +和NADH或NADP +和NADPH并计算氧化形式和还原形式的比率。
制备NADH，NADPH，NAD +和NADP +，并在磷酸盐缓冲液中稀释至指定浓度。
NAD / NADH-Glo™检测对NAD +和NADH具有选择性NADP / NADPH-Glo™检测对于NADP +和NADPH具有选择性。
试剂中存在的洗涤剂会裂解细胞，从而检测总细胞NAD +和NADH或NADP +和NADPH。对于NAD / NADH-Glo™分析，提供了一个辅助方案，以允许分别测量NAD +和NADH以及计算氧化形式和还原形式的比率。所有反应均直接在样品孔中进行。


与高通量系统兼容
简单的添加和读取协议与自动化和高通量工作流程兼容，灵活的化学方法可适应96孔，384孔和1,536孔板格式和高通量系统。产率Z'值> 0.7。在384孔板中使用8μl所示浓度的NADH或NADPH与8μl适当的萤光素检测试剂进行测定。S / B =信号与背景之比。