目前我在培养hFOB1.19细胞系,由于细胞库买不到,就经人介绍从细胞公司购买了,前后发了3次才自己培养活,按照说明条件进行培养,目前细胞贴壁状态不是很好,由于实验室条件限制只能在36.5℃培养(无法在33.5℃下培养),请问有没有人用此细胞系做过实验,想请教一下:1、培养温度是否对细胞影响大?2、我的培养液配比:F12 DMEM90%+Gibco胎牛血清10%+双抗+0.3g/ml G418,是否有优化(我曾增加了血清浓度,改变不大)的空间?3、这个细胞培养几天翻一倍?多久换一次液较好?4、6cm或15cm dish培养时铺盘时如何种最好?或者说长满后1传几长得比较好?谢谢各位路过的大神给予解答。