半抑制浓度(IC50)可以作为药物抗肿瘤活性的指标,能指示某一药物或者抑制剂在抑制某些物质如酶、细胞受体或者微生物的半量,该值可以用来衡量药物诱导凋亡的能力,即诱导能力越强,该数值越低。在细胞凋亡实验中可以通过计算出IC50值,来研究药物对肿瘤细胞的抑制作用,一些公司提供的细胞实验服务可以测定IC50值,根据IC50值比较药物的效价强度及药物的毒副作用等。
测定IC50值的时候,可以通过把药品稀释成不同的浓度,然后计算各自的抑制率,以药品的浓度为横坐标,抑制率为纵坐标作图,然后得到50%抑制率时候的药品浓度。在细胞实验服务中,通过计算IC50值可以衡量化合物对肿瘤细胞活性的抑制作用,从而有助于抗肿瘤药物的研发。四甲基偶氮唑盐(MTT比色)法可以检测细胞存活和生长的方法,其检测原理为活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶能使外源性MTT还原为水不溶性的蓝紫色结晶甲瓒并沉积在细胞中,而死细胞无此功能,MTT比色实验可以测定药物或者病毒的IC50。
如有研究者探讨了黄芪多糖对结肠癌HT-29细胞增殖、凋亡及周期的影响,以及黄芪多糖用于结肠癌治疗的抗肿瘤分子机制[1]。研究者在体外培养HT-29细胞, MTT法检测黄芪多糖抑制HT-29细胞增殖的半数致死量(IC50),设置不同的黄芪多糖浓度,检测黄芪多糖对HT-29细胞增殖能力的影响等。MTT实验结果显示黄芪多糖抑制HT-29细胞增殖的IC50为92.49μg/mL,黄芪多糖能够抑制人结肠癌细胞HT-29的增殖。研究结果发现黄芪多糖可使结肠癌HT-29细胞增殖减慢延缓、凋亡增加,细胞阻滞于G1期,其可能是黄芪用于结肠癌治疗的抗肿瘤机制。
CCK-8是用于测定细胞增殖或毒性实验中活细胞数目的一种高灵敏度,无放射性的比色检测法,可以用于测定IC50值。美迪西提供细胞实验服务,其生物部在分子生物学、细胞生物学、体外生物学和结构生物学领域有丰富广泛的经验。从最初的cDNA文库构建到药物设计,通过蛋白质纯化,结构测定和分析测定,提供一套完整的生物学服务。
在细胞实验中,通过对比不同化合物对肿瘤细胞的作用的IC50值,可以用于抗肿瘤化合物的筛选。如最近有研究者从分离萃取得到刺山柑的五个提取物中,筛选对刺山柑提取物最敏感的人肿瘤细胞系和对人肿瘤细胞抑制作用最强的活性提取物[2]。研究者以85%乙醇提取刺山柑药材,分别用等体积的石油醚、氯仿、乙酸乙酯萃取得石油醚提取物、氯仿提取物和乙酸乙酯提取物,剩余的水溶液部分减压浓缩后干燥得水溶性提取物;CCK-8法测定有效提取物的体外抑制作用。
结果发现刺山柑五个提取物对人非小细胞肺癌细胞A549、人乳腺癌细胞MCF-7、人卵巢癌细胞SK-OV-3、人前列腺癌细胞PC-3、人肝癌细胞Hep-G2、人结肠癌细胞HT-29这6种常见的人肿瘤细胞均有抑制作用,其半抑制浓度(IC50值)范围为:350.503~1 047.614μg•mL-1。其中以石油醚提取物对人卵巢癌细胞SK-OV-3效果最好,其对应的最大抑制率和IC50值分别为95.801%和350.503μg•mL-1。研究发现人卵巢癌细胞SK-OV-3对刺山柑石油醚提取物最为敏感。
总之以同一样品的不同浓度对肿瘤细胞生长抑制率作图可得到剂量反应曲线,从中求出样品的半数杀伤浓度IC50值,可以有助于抗肿瘤化合物的筛选,从而推动抗肿瘤药物的研发。
[1]黄芪多糖抑制结肠癌HT-29细胞生长作用研究[J].
[2]刺山柑体外抗肿瘤活性提取物的筛选研究[J].
测定IC50值的时候,可以通过把药品稀释成不同的浓度,然后计算各自的抑制率,以药品的浓度为横坐标,抑制率为纵坐标作图,然后得到50%抑制率时候的药品浓度。在细胞实验服务中,通过计算IC50值可以衡量化合物对肿瘤细胞活性的抑制作用,从而有助于抗肿瘤药物的研发。四甲基偶氮唑盐(MTT比色)法可以检测细胞存活和生长的方法,其检测原理为活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶能使外源性MTT还原为水不溶性的蓝紫色结晶甲瓒并沉积在细胞中,而死细胞无此功能,MTT比色实验可以测定药物或者病毒的IC50。
如有研究者探讨了黄芪多糖对结肠癌HT-29细胞增殖、凋亡及周期的影响,以及黄芪多糖用于结肠癌治疗的抗肿瘤分子机制[1]。研究者在体外培养HT-29细胞, MTT法检测黄芪多糖抑制HT-29细胞增殖的半数致死量(IC50),设置不同的黄芪多糖浓度,检测黄芪多糖对HT-29细胞增殖能力的影响等。MTT实验结果显示黄芪多糖抑制HT-29细胞增殖的IC50为92.49μg/mL,黄芪多糖能够抑制人结肠癌细胞HT-29的增殖。研究结果发现黄芪多糖可使结肠癌HT-29细胞增殖减慢延缓、凋亡增加,细胞阻滞于G1期,其可能是黄芪用于结肠癌治疗的抗肿瘤机制。
CCK-8是用于测定细胞增殖或毒性实验中活细胞数目的一种高灵敏度,无放射性的比色检测法,可以用于测定IC50值。美迪西提供细胞实验服务,其生物部在分子生物学、细胞生物学、体外生物学和结构生物学领域有丰富广泛的经验。从最初的cDNA文库构建到药物设计,通过蛋白质纯化,结构测定和分析测定,提供一套完整的生物学服务。
在细胞实验中,通过对比不同化合物对肿瘤细胞的作用的IC50值,可以用于抗肿瘤化合物的筛选。如最近有研究者从分离萃取得到刺山柑的五个提取物中,筛选对刺山柑提取物最敏感的人肿瘤细胞系和对人肿瘤细胞抑制作用最强的活性提取物[2]。研究者以85%乙醇提取刺山柑药材,分别用等体积的石油醚、氯仿、乙酸乙酯萃取得石油醚提取物、氯仿提取物和乙酸乙酯提取物,剩余的水溶液部分减压浓缩后干燥得水溶性提取物;CCK-8法测定有效提取物的体外抑制作用。
结果发现刺山柑五个提取物对人非小细胞肺癌细胞A549、人乳腺癌细胞MCF-7、人卵巢癌细胞SK-OV-3、人前列腺癌细胞PC-3、人肝癌细胞Hep-G2、人结肠癌细胞HT-29这6种常见的人肿瘤细胞均有抑制作用,其半抑制浓度(IC50值)范围为:350.503~1 047.614μg•mL-1。其中以石油醚提取物对人卵巢癌细胞SK-OV-3效果最好,其对应的最大抑制率和IC50值分别为95.801%和350.503μg•mL-1。研究发现人卵巢癌细胞SK-OV-3对刺山柑石油醚提取物最为敏感。
总之以同一样品的不同浓度对肿瘤细胞生长抑制率作图可得到剂量反应曲线,从中求出样品的半数杀伤浓度IC50值,可以有助于抗肿瘤化合物的筛选,从而推动抗肿瘤药物的研发。
[1]黄芪多糖抑制结肠癌HT-29细胞生长作用研究[J].
[2]刺山柑体外抗肿瘤活性提取物的筛选研究[J].