关于自主复制DNA序列的部分，说将带有正常酵母亮氨酸合成酶的基因的限制酶片段重组到大肠杆菌的质粒中，用重组质粒去转化亮氨酸合成代谢缺陷型的酵母细胞，发现单纯质粒不能转化酵母细胞，而重组质粒能在酵母细胞中复制表达。这个单纯质粒是什么玩意儿？

简介: 癫痫是一种常见多发的慢性脑部疾病,以脑部神经元过度放电所致的突然出现反复和短暂的中枢神经系统功能失常为特征。形成癫痫的原因多种多样,病理表现也各不相同。脑电图上的痫性发放和临床发作是癫痫的两个主要特征。痫性发放是局部神经元异常同步化活动在脑电图上的表现。作为大脑神经元活动的一种客观反映,目前通过脑电图检查发现痫样放电,仍是癫痫病诊断和癫痫灶定位的主要客观依据。 由于受条件的限制,人体癫痫脑电数据的样

尽管早在 170 年前，人们就在细胞中观察到了自然发生的细胞死亡现象，然而长期以来它都被视为是一种细胞被动现象。随着科学探索的逐渐推进，人们逐渐认识到这一现象并非被动地发生，而是一种主动地细胞行为。 如今，细胞凋亡检测是目前非常热门的研究方向，它不仅可以用于肿瘤细胞和组织在内的不同种类病理标本研究，还能应用于临床诊疗、新药研制、生物制品开发、肿瘤放化疗、以及肿瘤的基因治疗等，对于相关疾病的早期发现、放化疗

兔心肌梗死模型 分别采取高位结扎兔冠状动脉左前降支(LAD)和同时低位结扎LAD及冠状动脉左回旋支建立兔心肌梗死模型,并比较两种制备方法制备的兔心肌缺血模型。 模型制作方法 日本大耳兔,体重2.5-3.5kg,雌雄兼用。 (1)模型组 a、高位结扎冠状动脉左前降支组;b、同时低位结扎LAD+LCX(冠状动脉左回旋支)组。a和b组又分别分为缺血30min、1h、2h、4h、8h、1d、3d、1周、2周和4周共10个亚组。 (2)兔心肌梗死模型的复制 硫喷妥钠腹腔注射麻醉,自主呼吸,按心电导联

根据不同的实验目的,既可在整体动物身上复制心律失常,也可用离体心脏或心脏某部分组织块体外灌流复制心律失常。 常用的复制方法,有下列几种: 1、心房扑动和颤动性心律失常选用狗、猫等动物,麻醉后开胸,暴露心脏,在人工呼吸下进行实验。可用高频率电直接刺激心房壁,使每次刺激落于心房肌复极时R或S波间隔;乌头硷溶液涂抹心房外面局部;挤压动物上下腔静脉间的部位,同时给予电刺激;窦房结动脉内注入乙酰胆硷或甲状腺素制剂。或采用动物整体

【实验外包】细胞划痕 细胞划痕愈合法是测定细胞迁移运动与愈合能力的方法,类似体外伤口愈合模型,在体外培养皿或平板培养的单层贴壁细胞上,用微量枪头或其它硬物在细胞生长的中央区域划线,去除中央部分的细胞,然后继续培养细胞至实验设定的时间,取出细胞培养板,观察周边细胞是否生长(修复)至中央划痕区,以此判断细胞的生长迁移及修复能力。 特点: 1. 在一定程度上模拟了体内细胞迁移的过程。 2. 非常适合研究细胞与胞外基质(ECM),细胞与细胞

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在生物学研究中，除了某些细胞外的多肽激素和某些蛋白质与酶以外，经常会对细胞或组织进行破碎处理，使生物大分子充分释放到溶液中，并不丢失生物活性，最终目的是获得细胞内的物质。不同的生物体或同一生物体的不同部位的组织，其细胞破碎的难易不一，使用的方法也不相同，如动物脏器的细胞膜较脆弱，容易破碎，植物和微生物由于具有较坚固的纤维素、半纤维素组成的细胞壁，要采取专门的细胞破碎方法。 01 组织器官破碎方法 No.1 机

问大家，MPF和CDK1是同一种物质吗

模型制作方法: SD大鼠,7日龄,体重12-16g,雌雄兼用。模型组动物麻醉,结扎左侧颈总动脉,缝合切口,放回原饲养环境中回复2小时,置动物于2000ml密闭容器中,通入含有8%氧气的混合气体,流量为3l/min。2小时后恢复正常供氧。制成左侧大脑半球缺氧动物模型。 观测指标与分析: (1)脑组织病理学检查; (2)脑组织细胞凋亡检测; (3)闹组织缺氧诱导因子(HIF)-1amRNA表达水平检测; (4)脑组织半胱天冬酶表达水平的检测; (5)脑组织碱性成纤维细胞生长因子mRNA表达的检测; (6)脑神

腋皮下接种实体瘤动物模型实验原理 小鼠肉瘤S180为实验模型,接种于同种宿主的前肢腋皮下,给予一定剂量的有抗癌活性的药物,可以抑制肿瘤在体内的生长。本方法也适用于LL、B16、Hep等实体型移植性肿瘤模型,常用于抗肿瘤生长药物的研究。 操作步骤 取接种于小鼠约7~10天的S180肿瘤,无菌条件操作,剔除包膜和坏死部分,选取完好的瘤块,至于玻璃匀浆器或机械匀浆器内,加入适量的生理盐水,配制成瘤细胞悬液,细胞数为(1~2)*107 /ml,接种于同种异体小鼠前肢腋

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移植性肿瘤动物模型简介: 人源细胞(组织)移植到小鼠体内,并以此为模型进行疾病发生机制和药物筛选的研究。 目前肿瘤化疗所应用的大多数药物,都经动物移植性肿瘤试验而被发现,因此它是筛选抗肿瘤新药中最常用的模型。 优点: 其优点是接种一定量瘤细胞或无细胞滤液(病毒性肿瘤)后,可以使一群动物带有同样的肿瘤,生长速率较一致,个体差异较小,接种存活率近100%。地宿主的影响也类似,易于客观判断疗效,且可在同种或同品系动物中连续移植,长期保

细胞分离是指将组织分散制成细胞悬液后从中获取目的细胞的过程。细胞纯化更进一步强调从原代培养前成分混杂的异质性细胞悬液中或者从培养物中获得单一类型细胞的过程。 分离和纯化细胞的过程不仅仅在原代培养之前进行的，有时分离和纯化细胞的过程还贯穿于原代培养和继代培养的过程中，甚至是主要依赖培养过程实现分离和纯化细胞的目的。 细胞分离纯化的方法有密度梯度离心技术、逆流淘析分离技术、利用细胞表面标志分离纯化细胞的

选取健康月龄6个月的新西兰大白兔6只,均制备左侧股骨中段长1.5cm的段缺性骨与骨膜缺损。 从兔左后肢股骨前外侧纵切口,切开皮肤、皮下组织和深筋膜,沿股直肌与股外侧肌间隙锐性分开进入,不切开骨膜,于股骨前外侧放置已塑形好的4孔普通钢板,钢板预弯弧度5°～8°,以使钢板和股骨向前外凸的弧度相吻合。 电钻钻孔后依次旋入4枚螺钉固定,可在两边两个螺钉之间各加用一根细钢丝环扎以增加牢固性。于钢板第2、3孔之间,以线锯锯断股骨一侧,用直尺测

做实验的，大都知道细胞身娇体弱难培养，一言不合就死给你看。虽说人生百态，死法万千，但对细胞而言，谢幕的方式主要有几种：凋亡、坏死、焦亡。 其中，凋亡（细胞程序性死亡，PCD）则是细胞以优雅老死的方式来定格生命消逝时的最后瞬间。 而这个过程大致分为以下几个阶段：接受凋亡信号→凋亡调控分子间的相互作用→调节蛋白水解酶的活性(Caspase)→进入连续反应过程。 细胞凋亡与细胞坏死不同，细胞凋亡不是一件被动的过程，而是主动

简介: 梅尼埃病(Ménières disease)是一种特发性内耳疾病,在1861年由法国医师Prosper Ménière首次提出。该病主要的病理改变为膜迷路积水,临床表现为反复发作的旋转性眩晕、波动性听力下降、耳鸣和耳闷胀感。本病多发生于30～50岁的中、青年人,儿童少见。男女发病无明显差别。双耳患病者约占10%～50%。目前已知的病因包括以下因素:各种感染因素(细菌、病毒等)、损伤(包括机械性损伤或声损伤)、耳硬化症、梅毒、遗传因素、过敏、肿瘤、白血病及自身免

1.组织包埋 （1）乙醇脱水：组织经不同浓度的乙醇溶液进行逐级脱水 70％ 80％ 90％ 95％ 100％ 100％，各级乙醇 40min（注意：骨性及钙化组织需在JYBL-Ⅱ脱钙液中浸泡24h，待组织软化后再进行乙醇脱水步骤）； （2）透明：组织依次浸泡于三个二甲苯中，每缸各1h； （3）浸蜡：组织依次浸泡于三个石蜡缸中，每缸各1h； （4）包埋：将液态的石蜡倒入模具盒中，再将浸好蜡的组织块平放底部，注意切面方向朝下放置，待石蜡凝固后去掉包埋框，完全冷却变

什么是DNA甲基化? 表观遗传学(Epigenetics)是指DNA序列不发生变化.但基因表达却发生可遗传的改变.包括DNA甲基化组蛋白修饰、染色体重塑和非编码RNA调控等。DNA甲基化(DNA methylation)为DNA化学修饰的一种形式即在DNA甲基化转移酶的作用下,基因组CpG二核苷酸的胞嘧啶5碳位共价键结合一个甲基基团。 *DNA甲基化有哪些类型? DNA甲基化反应分为2种类型。一种是2条链均未甲基化的DNA被甲基化,称为从头甲基化(denovomethylation);另一种是双链DNA的其中一条链已存在甲基化

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创伤后应激障碍(posttraumatic stress disorder,PTSD)是指个体由于经历对生命具有威胁的事件或严重的创伤,导致系列精神症状长期持续的精神障碍。美国精神障碍诊断统计分类手册-第四版(DSM-Ⅳ)将PTSD归在焦虑障碍中,并将其分为三种类型:急性(症状持续小于3个月)、慢性(症状至少持续3个月)、伴延迟起病(症状在应激后至少6个月才出现)。PTSD症状主要表现为对创伤事件的病理性重现(re-experiencing)、对创伤相关线索的回避(avoidance)、持续性的高唤醒(hyperarousal),以及

模型制作方法: SD大鼠,7日龄,体重12-16g,雌雄兼用。模型组动物麻醉,结扎左侧颈总动脉,缝合切口,放回原饲养环境中回复2小时,置动物于2000ml密闭容器中,通入含有8%氧气的混合气体,流量为3l/min。2小时后恢复正常供氧。制成左侧大脑半球缺氧动物模型。 TEL：15888445000（微信同号） 观测指标与分析: (1)脑组织病理学检查; (2)脑组织细胞凋亡检测; (3)闹组织缺氧诱导因子(HIF)-1amRNA表达水平检测; (4)脑组织半胱天冬酶表达水平的检测; (5)脑组织碱性成纤维细胞生长

怎样设计实验证明血清能够诱导C2C12细胞分化为心肌细胞呢

实验动物: KM小鼠,体重18-22g,雄性。 实验仪器: 高架十字迷宫、MODEL-102型焦虑仪 实验步骤: 小鼠皮下注射药物,剂量由25mg/kg增至500mg/kg(每日增加25mg,至150mg/kg时维持至7天),每日给药两次,连续给药7天,8天停药。每日称重后给药,分别于自然戒断后18h、24h、72h、96h、120h进行高架十字迷宫实验。实验于每天10:00-16:00安静环境下进行。实验前将每只小鼠放进一个塑料盒中,让其熟悉环境5分钟后置于迷宫中央,记录5分钟内小鼠分别进入开臂和闭臂的次数以及在两臂内滞

细胞划痕愈合法是测定细胞迁移运动与愈合能力的方法,类似体外伤口愈合模型,在体外培养皿或平板培养的单层贴壁细胞上,用微量枪头或其它硬物在细胞生长的中央区域划线,去除中央部分的细胞,然后继续培养细胞至实验设定的时间,取出细胞培养板,观察周边细胞是否生长(修复)至中央划痕区,以此判断细胞的生长迁移及修复能力。 特点: 1. 在一定程度上模拟了体内细胞迁移的过程。 2. 非常适合研究细胞与胞外基质(ECM),细胞与细胞之间相互作用引起的细

精神分裂症是一种严重而复杂的精神疾病,人群发病率高达1%。它的典型症状包括思维障碍、幻觉、错觉和妄想等阳性症状,以及社会退缩、情感淡漠和意志缺乏等阴性症状,这些症状主要涉及注意、记忆、抽象思维、信息整合以及执行功能等认知功能。 TEL ：15888445000（微信同号） 如何建立精神分裂症认知障碍的动物模型对于了解精神分裂症的病因学机制、抗精神分裂症药物的作用机理以及新药开发都具有非常重要的意义。而建立精神分裂症的动物模型

简介: 梅尼埃病(Ménières disease)是一种特发性内耳疾病,在1861年由法国医师Prosper Ménière首次提出。该病主要的病理改变为膜迷路积水,临床表现为反复发作的旋转性眩晕、波动性听力下降、耳鸣和耳闷胀感。本病多发生于30～50岁的中、青年人,儿童少见。男女发病无明显差别。双耳患病者约占10%～50%。目前已知的病因包括以下因素:各种感染因素(细菌、病毒等)、损伤(包括机械性损伤或声损伤)、耳硬化症、梅毒、遗传因素、过敏、肿瘤、白血病及自身免

本周线上讲座 主题：巨噬细胞极化研究思路及案例析 巨噬细胞（Macrophages）是一种位于组织内的白血球，源自单核细胞，这种细胞在正常发育、体内平衡、组织修复和对病原体的免疫反应中扮演了许多不同的角色。这也就是说，几乎每一种人类疾病都涉及它们，它们也是主要治疗目标，因为它们的功能可以被加强或抑制，以改变疾病的结果。

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大鼠肾脏原位移植手术方法: 手术在室温25 、相对湿度60%的清洁非无菌环境中进行。 1.110%盐酸氯胺酮注 射液和硫酸阿托品、酚妥拉明注射液、 肝素钠注射液、利多卡因注射液。 1.2 麻醉方法 10%盐酸氯胺酮注 射液,15 mg(100 g)-1,肌肉注射麻醉,术中注意保温。 1.3 科技术从供体切取双侧肾脏,放入4 肾脏保存液。左侧肾脏植入 个受体,原位端端缝合肾脏动、静脉,供肾输尿管与受体输尿管上端间断缝合6 针。右侧肾脏翻转180后植入第2 个受体左侧肾窝, 与受体的

基础科研实验 中洪博元现有约10000㎡场地投入使用，持有SPF级动物使用许可证。模式动物研究中心建有细胞实验室、基因编辑实验室、核酸蛋白实验室、分子实验室、生物材料实验室、蛋白组学实验及病理等配套实验室，为动物实验提供数据检测和分析服务。现有成熟呼吸系统模型、骨骼系统模型、神经系统模型、消化系统模型、泌尿生殖系统模型、创伤模型、糖尿病和肥胖模型、循环及内分泌系统模型、皮肤及损伤模型、其他特殊模型构建技术。

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腋皮下接种实体瘤动物模型 实验原理 小鼠肉瘤S180为实验模型,接种于同种宿主的前肢腋皮下,给予一定剂量的有抗癌活性的药物,可以抑制肿瘤在体内的生长。本方法也适用于LL、B16、Hep等实体型移植性肿瘤模型,常用于抗肿瘤生长药物的研究。 操作步骤 取接种于小鼠约7~10天的S180肿瘤,无菌条件操作,剔除包膜和坏死部分,选取完好的瘤块,至于玻璃匀浆器或机械匀浆器内,加入适量的生理盐水,配制成瘤细胞悬液,细胞数为(1~2)*107 /ml,接种于同种异体小鼠前肢

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动物实验、细胞实验-北京百奥思科13716687080微信同步 细胞凋亡这一概念最早在1972年由J.F.R.Kerr等人在研究组织变化时提出的（KerrJFR等，1972）。细胞凋亡又称为细胞程序化死亡，是指细胞受到特定的细胞内信号或细胞外信号的诱导刺激，激活下游的死亡途径，在基因的调控下进行的一系列的细胞死亡过程。细胞凋亡对生物生长发育、伤口愈合等过程具有至关重要的意义。 细胞死亡方式的另一种方式被称为细胞坏死，但是细胞凋亡和细胞坏死具有截然不

SPF实验动物中心-细胞整体实验外包-北京百奥思科13716687080微信同步 01 Treg细胞概述 天然CD4+ CD25+ 调节性T细胞(regulatory T cell，Treg)是一类具有免疫抑制作用的T细胞，约占外周血单个核细胞（PBMC）2%～5%，约占外周CD4+T细胞的5～10%。该类细胞以“主动”的方式参与免疫应答/免疫耐受的调控，不仅参与自身免疫耐受调节，而且在肿瘤免疫和移植免疫中也具有重要的作用。 02 Treg细胞的常用的分子标记 抗原分子 表达及其功能 CD4+ 与MHC II类分子结合；主要表达

原位杂交是指将特定标记的已知顺序核酸为探针与细胞或组织切片中核酸进行杂交,从而对特定核酸顺序进行精确定量定位的过程。原位杂交可以在细胞标本或组织标本上进行。 原位杂交是在研究DNA分子复制原理的基础上发展起来的一种技术。其基本原理是两条核苷酸单链片段,在适宜的条件下,能过氢键结合,形成DNA-DNA、DNA-RNA或 RNA-RNA 双键分子的特点,应用带有标记的(有放射性同位素,如3H、35S、32P、荧光素生物素、地高辛等非放射性物质)DNA或RNA片段作

活体成像主要采用生物发光（bioluminescence）与荧光（fluorescence）两种技术。生物发光是用荧光素酶（Luciferase）基因标记细胞或DNA，而荧光技术则采用荧光报告基团（GFP、RFP、Cyt及dyes等）进行标记。采用一套非常灵敏的光学检测仪器，让研究人员能够直接监控活体生物体内的细胞活动和基因行为。通过这个系统，可以观测活体动物体内肿瘤的生长及转移、感染性疾病发展过程、特定基因的表达等生物学过程。传统的动物实验方法需要在不同的时间点宰

糖尿病(diabetes mellitus ,DM)已成为严重危害人类健康的公共卫生问题。DM及其并发症不仅严重影响糖尿病患者的生活质量,同时也是致残、致死的重要原因。因此,建立合适的糖尿病动物模型,阐明DM及其并发症的发病机制就显得尤为重要。目前,DM动物模型制备方法主要有:手术切除胰腺、化学药物诱导、自发性糖尿病动物模型、转基因动物等。 一、切除胰腺的DM模型 常采用狗、猫和大鼠等造模,全部或大部分切除实验动物的胰腺,但保存胰十二指肠动脉吻合弓

模型制作方法: SD大鼠,7日龄,体重12-16g,雌雄兼用。模型组动物麻醉,结扎左侧颈总动脉,缝合切口,放回原饲养环境中回复2小时,置动物于2000ml密闭容器中,通入含有8%氧气的混合气体,流量为3l/min。2小时后恢复正常供氧。制成左侧大脑半球缺氧动物模型。 观测指标与分析: (1)脑组织病理学检查; (2)脑组织细胞凋亡检测; (3)闹组织缺氧诱导因子(HIF)-1amRNA表达水平检测; (4)脑组织半胱天冬酶表达水平的检测; (5)脑组织碱性成纤维细胞生长因子mRNA表达的检测; (6)脑神

CD4和CD8细胞 白细胞又称为免疫细胞(immune ell).包含淋巴细胞和吞噬细胞等.其中淋巴细胞是免疫系统的基本成分。 淋巴细胞包含T淋巴细胞(CD3+)、B淋巴细胞( CD3-CD19+)、NK细胞( CD3-CD16+CD56+),其中T淋巴细胞是淋巴细胞的主要组成部分。 T淋巴细胞即胸腺依赖淋巴细胞"thymus dependent lymphocyte”简称T细胞。 CD3+淋巴细胞指的是全T淋巴细胞 包含CD3+CD4+细胞(辅助/话导T淋巴细胞)、CD3+CD8+细胞(抑制 细胞毒T淋巴细胞)CD4+CD45RA+/CD4+CD45RA+62L+(CD4+T细胞纯真亚群)和 CD4+CD45RA-/

高原红细胞增多症(简称“高红症”)是由于高原低氧引起的红细胞过度代偿性增生(即红细胞增生过度)的一种慢性高原病。与同海拔高度的健康人相比,高红症病人的红细胞、血红蛋白、红细胞容积显著增高,动脉血氧饱和度降低,并伴有多血症的临床症状及体征。此病多见于高原移居人群,少见于高原世居人群,男性发病率明显高于女性,儿童病例罕见。采用低氧、高寒、口服氯化钴等复合因素可复制大鼠高原红细胞增多症疾病模型。 模型制作方法: 鼠的类

什么是实验外包? 实验外包即将实验外包于独立科研机构之外的第三方实验室，已经成为发展趋势。第三方实验室不仅实验设备先进，可操作实验的规模和种类也是多种多样，国家层面也出台政策推动科研单位与企业利用资源优势互补，提高科研效率。 为什么选择实验外包? 节省时间 实验周期长，耗费时间多，将实验外包可以节省大量时间。 节约费用 实验仪器繁多，价格昂贵，将实验外包可以节省实验设备采购，将有限的科研费用用在更重要的事情

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大鼠肾脏原位移植手术方法: 手术在室温25 、相对湿度60%的清洁非无菌环境中进行。 1.110%盐酸氯胺酮注 射液和硫酸阿托品、酚妥拉明注射液、 肝素钠注射液、利多卡因注射液。 1.2 麻醉方法 10%盐酸氯胺酮注 射液,15 mg(100 g)-1,肌肉注射麻醉,术中注意保温。 1.3 科技术从供体切取双侧肾脏,放入4 肾脏保存液。左侧肾脏植入 个受体,原位端端缝合肾脏动、静脉,供肾输尿管与受体输尿管上端间断缝合6 针。右侧肾脏翻转180后植入第2 个受体左侧肾窝, 与受体的

台盼蓝检测细胞活性 中洪博元有话说： 台盼兰染色法价格低廉，操作简单，又不用无菌操作，做这个实验只要是把显微镜调好了，细胞浓度调好了就不会有问题，是一个养细胞的入门实验，所以很适合初学者做。 中洪拥有专业的实验团队，一流的实验设备，今天和大家分享的台盼蓝检测细胞活性实验技术，希望大家能从中学到知识，获得启发。 实验原理 细胞损伤或死亡时，台盼蓝可穿透变性的细胞膜，与解体的DNA 结合，使其着色。而活细胞能阻止

【课程分享】质心生物竞赛视频课程+讲义

1、试剂配置 1、IxPBS 缓冲液：NaCl 8.0g、KCl 0.2 g、 Na2HPO4- 12H2O 2.85 g、KH2PO4 0.24 g， 加双蒸水900ml溶解，调pH值至7.4，量筒定容至IL，高温高压灭菌后使用。 2、0.5%Triton X-100：取50ul Triton X-100加入10mlPBS中，然后放入37℃水浴锅溶解。 2、实验步骤 细胞爬边固定： 1）在培养板中将已爬好细胞的玻片用PBS浸洗3次，每次3min；用4%的多聚甲； 2）醛固定爬片15min， PBS浸洗玻片3次，每次3min。 细胞的通透： 打孔：0.5%Triton X-100( PBS配制 )室温通透20min。 封闭：PBS浸洗玻