研究认为，持续过量无序地在动物饲料中使用抗生素产品，将会导致机体耐药性快速出现，造成药物使用无效的尴尬境地。因此，抗生素药品的耐药性和一些药物在食品中的残留问题引起了人们的困惑。因此 桉树精油产品被认定为是“安全、高效、稳定、可控”的饲料添加剂，逐渐成为绿色环保安全动物食品生产和饲料工业充满活力的新的经济增长点。桉树精油具有抗菌、杀虫、免疫增强剂及促进生长的作用，为水产动物绿色健康养殖提供科学替抗

东佛山高明区一养殖杂交黄颡鱼池塘，水面面积8亩，水深1.5米，4台1.5kW叶轮增氧机、1台1.5kW水车增氧机（图1）。存塘鱼30万尾左右，“鱼头”4两/尾，日常投喂两餐，早、晚各4包料，共320斤。 阿图1 发病池塘 2021年4月15日，吃料减慢，当天死鱼10多尾。 4月16日，当天死鱼约20斤。发病鱼体表光滑，主要表现为游水、红肛门、“大肚子”、腹水严重、肠道充血等症状。上午9点“海控在手”检测溶氧4.86mg/L，饱和度52%，水温24.3℃；快速水质测试盒检测pH值6

4、水产品的检测

伴随着水产养殖规模的扩大化，对于提高产量，降低水产病害的需求大大增加。 当前水产病害常见的有鱼类细菌性败血症、 细菌性肠炎病等由弧菌属 Vibrio 中的鳗弧菌 Vibrioanguillarum、 气 单 胞 菌 属 Aeromonas 中的嗜水气单胞菌 Aeromonashy2drophila、爱德华氏菌属 Edwardsiella 中的迟缓爱德华氏菌 Edwardsiellatarda 等细菌引起。 通常采取药物控制， 但存在不安全因素。 因此，建立良好的防治机制，提前防止病害发生则具有重要意义。
PCR 技术可对上述多种细菌进行平行检测，大批量、快速地实现检测的需求。
5、对饮用水中致病因素的检测
水资源在人们日常生活中至关重要， 饮用水的安全关系到全人类的生存，对于水质的要求日益提高。 引用不清洁的水会对人体和动植物造成危害。 水体中的致病性微生物如各种细菌、病毒、原生动物、蠕虫等，大部分可由动物粪便传播，严 重危害了人体健康，因此需要建立快速准确的鉴别方法。
PCR 技术是一种理想的测试方法。
6、对食源性病原微生物的检测
因 PCR 技术高特异性、高灵敏度，可特异性鉴别病原微生物及对其致病性菌株进行分析。 因此此技术在病原微生物 检测方面应用前景广泛。 在食品常见食源性病原微生物检测中市面上已经有部分商业试剂盒在售。
7、对食品中沙门氏菌的检测
沙门氏菌常见于不合格的食品中， 可对人及家禽家畜感染致病，还可感染爬行类、鱼、两栖类及昆虫。 人畜感染后可呈无症状带菌状态，也可加重病态或死亡率，或者降低动物的繁殖生产力，因此需要及时、快速评价食品中微生物。
PCR 技术作为一种高效快速检测的途径， 可检测 0.05pg 水平的 DNA， 其检测时间可缩短至 24h。然而 PCR 技术也不能在沙氏门菌的检验方面达到百分之百，其对引物进行筛选时，也比较容易出现错误。
因此需要深入发展 PCR 技术，对其进行优化，降低成本，提高准确度，并且对 PCR 技术进行推广，使其运行成本 降低，普及性增加，在市场上能够比较容易地出现 PCR 检 测 技术，食品安全更快速、安全、高效，体系更加完善。

肝脏 肝组织中没有发现有肉芽肿结构，只是扩张的肝血窦中会发现许多增生的巨噬细胞浸润其中(图版Ⅱ-6略)。部分病鱼的肝细胞发生脂肪变性，严重者会发生坏死。
肠 粘膜下层和固有层中出现巨噬细胞浸润现象，在部分病鱼中常伴有血管扩张、充血。在慢性感染病鱼的肠粘膜层中偶见有肉芽肿结构出现。
鳃 见有大量的巨噬细胞出现。肉芽肿结构也偶尔见于慢性感染病鱼的鳃小叶呼吸上皮层下。
3 讨论
3．1 大菱鲆爱德华氏菌病的致病菌为迟钝爱德华氏菌 利用所分离到的菌株对健康大菱鲆进行的人工感染试验表明，菌株QL-R、QL-W、QL-S，QL-2和QL-4均能使健康大菱鲆致病死亡，且表现出与自然状态下急性感染相似的临床特征。因此，可确认这5株细菌均是大菱鲆爱德华氏菌病的病原菌。而注射菌株QL-1和QL-3的大菱鲆存活正常，证明这两株细菌在本次人工感染中无致病能力。但是否为非致病菌或者是条件致病菌还有待进一步的试验加以证实。
根据生理生化的测试结果，参考伯杰氏细菌鉴定手册并结合API鉴定，菌株QL-R，QL-W和QL-S均应属于爱德华氏菌属中的迟钝爱德华氏菌，且为野生型。以菌株QL-S为代表进行的16S rDNA序列分析和构建系统发育树，也显示出其与迟钝爱德华氏菌有着非常相近的亲缘关系。综合生理生化特征和16S rDNA序列分析的结果，将QL-S鉴定为迟钝爱德华氏菌。菌株QL-R，QL-W，QL-2以及QL-4表现出与QL-S非常相似的特性，应属于同一菌种。结合病鱼的临床表现及组织病理变化的特点，从而认为养殖场B、C、D、E和F的病鱼也是均由迟钝爱德华氏菌感染所致。
自1962年迟钝爱德华氏菌病首次在日本鳗鲡中发现以来，世界许多国家和地区相继报道了其它鱼类发生此病的情况。在我国，迟钝爱德华氏菌主要能引起鳗鲡、牙鲆、罗非鱼、鲤、鳖等水产动物患病。关于大菱鲆爱德华氏菌病，迄今国外只有很少的研究。本文属国内首次报道爱德华氏菌感染养殖大菱鲆致病。
3．2 爱德华氏菌病的两种不同感染形式
流行病学特征分析发现，大菱鲆爱德华氏菌呈现出急性和慢性两种感染形式。急性感染的大菱鲆表现为体表皮下充血、脓样发炎、肾脏肿大、坏死等l临床特征，这与迟钝爱德华氏菌感染其它鱼类的表现是一致的。然而慢性感染的大菱鲆有其独特的临床表现，例如身体后半部变黑等症状在其它鱼类中没有发现。有研究表明，迟钝爱德华氏菌的最适生长温度是28～37℃，当养殖温度升高到20和25℃时，迟钝爱德华氏菌的毒性能够得到较大提高。而大菱鲆的养殖温度一般控制在l5～20℃。由此初步推断，由于大菱鲆养殖水温相对较低，使得迟钝爱德华氏菌的繁殖与毒力受到影响，这可能是大菱鲆迟钝爱德华氏菌病更多地表现为慢性感染形式的原因之一。尽管如此，大菱鲆迟钝爱德华氏菌病的急性感染形式也时有发生，这种情况可能与养殖水温偏高、放养密度大、养殖环境有机物过多等因素有关，导致较严重的急性感染发生。所以在大菱鲆养殖过程中，优良的养殖条件和规范的管理对于预防迟钝爱德华氏菌感染尤为重要。
3．3 大菱鲆爱德华氏菌病的病理分型属肾脏型
组织病理学研究发现，迟钝爱德华氏菌导致的病理变化广泛，受损组织不仅为肾脏而且涉及脾脏、肝脏、肠、鳃和皮肤等多种组织器官，属于全身性感染。感染早期，以渗出性炎症和单核巨噬细胞增生为特点；而中后期感染多以巨噬细胞极度增生和形成肉芽肿为病变特征。类似的组织病理变化特点在感染迟钝爱德华氏菌的大口黑鲈、牙鲆、罗非鱼、鲶鱼和斑马鱼的组织病理学研究中也均有发现。Miyazaki等报告在自然发病的日本鳗鲡爱德华氏菌病中存在两种不同的类型。一种是主要病灶在肝脏，肾脏中仅是增生性浸润反应，即肝脏型；另一种是主要病灶在肾脏，即肾脏型。国内报道的水产动物爱德华氏菌病大都属于肝脏型，而郭琼林等发现鳗鲡爱德华氏菌感染可分肝脏型和肝肾混合型，没有发现单纯的肾脏型。从调查研究结果来看，笔者所见到的感染迟钝爱德华氏菌的大菱鲆均表现出肾脏为易感器官，其病理变化较其他组织器官相比也最为显著的特点。因此，此次调查研究中的大菱鲆爱德华氏菌病应属于肾脏型。
在病理分析中发现，几乎所有病鱼的肾脏都明显肿大，这一现象与Miyazaki等和Darwish等报道的其它感染爱德华氏菌的鱼类表现是一致的。值得注意的两个问题是：(1)养殖场A病鱼的肾脏呈现典型的肿大、白色黍粒状结节，虽然从中未分离得到迟钝爱德华氏菌，但病鱼的临床症状却与迟钝爱德华氏菌感染的大菱鲆非常相似，即外观表现为身体后半部体色明显变黑，另外大部分肾脏组织被成熟的肉芽肿所取代。在我们的研究过程中，也有其它病鱼样品分析表明感染肾脏的成熟肉芽肿处较难分离得到细菌。Miyazaki等和Darwish等在相关研究中认为巨噬细胞形成的肉芽肿与消灭迟钝爱德华氏菌有关。这可能是笔者从养殖场A的取样病鱼中无法分离到迟钝爱德华氏菌或分离菌量极少的原因所在。结合患病鱼的临床表现和组织病理学变化特点，我们认为养殖场A的大菱鲆患病也是由迟钝爱德华氏菌感染所致。(2)慢性感染的大菱鲆均表现出身体后半部变黑的独特症状，这一现象在其它鱼类中没有报道。在其人工感染试验中，有发现典型的肾脏肿大和变自现象，但由于均以高浓度的菌悬液(9×lO6mL-1)进行人工感染，所得感染症状都与自然状态下急性感染的病鱼症状相似，而未产生身体后半部变黑的慢性病变特征。如何解释身体后半部变黑与迟钝爱德华氏菌慢性感染之间的相关性，今后需进行低浓度细菌的人工感染试验来证实，同时研究探讨健康和感染状态下大菱鲆皮肤色素的控制和病变机理。

3、在微生物学中的应用
利用 PCR 技术对微生物进行检测，是指就是检测它的核苷酸。 利用 PCR 技术，可以在特定的条件下，像高温使其发生变形使 DNA 进行大量的复制和扩增。
如果利用传统的方法对事物进行检测， 这个过程相当复杂， 不仅需要耗费大量的时 间，也会耗费大量的人力和物力，这就在一定程度上限制了检测的顺利开展。
但是，如果融合 PCR 技术，那么对于 DNA 的 检测工作就会变得非常简单，而且准确性能够得到保障。在理论上， 只要一个小小的分子就可以制造出成千上万 的 DNA，我们可以通过 PCR 技术对这些 DNA 进行检测，随着 科学技术的不断发展以及各种学科的扩充， 我们的科研水平 也要上升到另外一个层次， 即使这项技术已经取得了很大的 提升，但是在食品工程方面仍然有很大的提升空间，因此，立 足于食品检测的视角，这项技术仍然需要继续加强。
4、水产品的检测
伴随着水产养殖规模的扩大化，对于提高产量，降低水产病害的需求大大增加。 当前水产病害常见的有鱼类细菌性败血症、 细菌性肠炎病等由弧菌属 Vibrio 中的鳗弧菌 Vibrioanguillarum、 气 单 胞 菌 属 Aeromonas 中的嗜水气单胞菌 Aeromonashy2drophila、爱德华氏菌属 Edwardsiella 中的迟缓爱德华氏菌 Edwardsiellatarda 等细菌引起。 通常采取药物控制， 但存在不安全因素。 因此，建立良好的防治机制，提前防止病害发生则具有重要意义。
PCR 技术可对上述多种细菌进行平行检测，大批量、快速地实现检测的需求。
5、对饮用水中致病因素的检测
水资源在人们日常生活中至关重要， 饮用水的安全关系到全人类的生存，对于水质的要求日益提高。 引用不清洁的水会对人体和动植物造成危害。 水体中的致病性微生物如各种细菌、病毒、原生动物、蠕虫等，大部分可由动物粪便传播，严 重危害了人体健康，因此需要建立快速准确的鉴别方法。
PCR 技术是一种理想的测试方法。
6、对食源性病原微生物的检测
因 PCR 技术高特异性、高灵敏度，可特异性鉴别病原微生物及对其致病性菌株进行分析。 因此此技术在病原微生物 检测方面应用前景广泛。 在食品常见食源性病原微生物检测中市面上已经有部分商业试剂盒在售。
7、对食品中沙门氏菌的检测
沙门氏菌常见于不合格的食品中， 可对人及家禽家畜感染致病，还可感染爬行类、鱼、两栖类及昆虫。 人畜感染后可呈无症状带菌状态，也可加重病态或死亡率，或者降低动物的繁殖生产力，因此需要及时、快速评价食品中微生物。
PCR 技术作为一种高效快速检测的途径， 可检测 0.05pg 水平的 DNA， 其检测时间可缩短至 24h。然而 PCR 技术也不能在沙氏门菌的检验方面达到百分之百，其对引物进行筛选时，也比较容易出现错误。
因此需要深入发展 PCR 技术，对其进行优化，降低成本，提高准确度，并且对 PCR 技术进行推广，使其运行成本 降低，普及性增加，在市场上能够比较容易地出现 PCR 检 测 技术，食品安全更快速、安全、高效，体系更加完善。
8、多重 PCR 技术
多重 PCR 技术是在原有技术的基础上引入其他模板，对 DNA 片段进行扩展， 具有超越原有 PCR 技术 的优点。 多重 PCR 技术作为一种新技术， 能够降低成本， 提高检测的准确性，在检测领域更加优异。
小结
PCR 技术自动化程度较高，操作方便快捷，步骤简化，效率较高，此外，PCR 技术检测所需的人工操作步骤较少，使间接污染或失误操作发生的概率降低，检测结果的准确性增强。其机械化程度也使检测速度加快， 缩短了操作时间。 总而言 之，食品是非常容易受到感染的，因 此，食品检测技术尤为关键。 然而，如果我们仍旧采用之前的检测办法根本无法真正达到检测的目的。 在食品检测的过程中应用 PCR 技术，可以更加方便快捷地检测到相应的数据，让人们更加放心。
百检检测|