荧光定量PCR实验方法和应用介绍 实时荧光定量PCR（Quantitative Real-time PCR）是一种在DNA扩增反应中，以荧光化学物质测每次聚合酶链式反应（PCR）循环后产物总量的方法。通过内参或者外参法对待测样品中的特定DNA序列进行定量分析的方法。 在常做的QPCR反应体系中，加入过量SYBR荧光染料，SYBR荧光染料特异性地掺入DNA双链后，发射荧光信号，而不掺入链中的SYBR染料分子不会发射任何荧光信号，从而保证荧光信号的增加与PCR产物的增加完全同步。 在Real-t

公司在北京运行近十年，实验室位于北京大兴，可来实验室参观，病理实验，细胞分子实验，动物实验等常规实验及检测都可接；课题设计及整体实验也有较多成功案例，欢迎各位老师来询，问问不亏#实验# 。

请问有谁知道，下面这三个结构，哪个是有两个双键的吗，对紫外线检测更敏感的

大小鼠冷热板测痛仪使用简便，指标明确，对组织损伤小，动物可反复使用，痛反应潜伏期较长，便于观察及测出之间的较小差异，比较出镇痛作用的强弱、快慢及持续时间，同时可导出检测数据。 这种仪器被广泛应用于神经科学、药理学、毒理学等领域的研究中，可以帮助研究人员了解小鼠或大鼠对疼痛的反应机制，以及评估不同药物或治疗方法对疼痛的影响。 技术参数： 1、从室温加热到55℃的时间： ≤5分钟 2、温度显示误差： 0.1℃ 3、 温度控

脑缺血（cerebral ischemic）是指脑内血流不足以满足大脑正常代谢需求的病理生理状态。脑缺血常常会造成不同程度的脑损伤，因此被认为与神经退行性疾病相关。 临床上，脑缺血性疾病约占所有脑血管疾病的80%。具有高发病率、高致残率、高死亡率的特点，是严重危害人类健康的疾病之一。由于临床研究的种种限制，为了更好地理解脑缺血的发病机制以及寻找有效治疗方法，自然需要相应的动物模型，以便开发相应的治疗手段。 今天，就来聊聊“脑

求牛前列xian，用来做实验🔬

得益于生物资源和相关基因序列数据如今能够随时便捷获取，加上蛋白质生产系统的进步，许多实验室开始自行生产用作生物试剂的蛋白质。这使研究人员能够控制实验中使用的蛋白质的成本、可用性和质量。然而，许多在各自实验室负责生产重组蛋白的研究人员对现有的基因表达系统几乎没有或根本没有经验。 这篇指南的核心是评估了最常用的基因表达系统的关键特征，以此指导准备开始蛋白质生产的研究者选择最适合其需求和资源的系统。系统

动物模型 | 脉络膜新生血管动物模型的构建 脉络膜新生血管(choroidal neovascularition，CNV)又名视网膜下新生血管，是来自正常脉络膜组织的增殖血管，可通过Bruch膜破损处进入Bruch膜与视网膜色素上皮层(retinal pigment epithelium，RPE)之间、视网膜神经上皮层与RPE之间、RPE与脉络膜之间。CNV是许多脉络膜视网膜疾病，如年龄相关性黄斑变性渗出期、高度近视黄斑变性等发生发展中的重要病理机制。为了进一步发现这些疾病确切的发病机理，制作接近临床特征的CN

Western blot是一个非常基础的实验，但是着实让我们头疼，即使是老手也挡不住WB实验的千锤百炼，懂得都懂，下面小编根据经验总结一篇WB实验过程会遇到的常见问题及解决方案，希望对正在做WB实验的小伙伴提供一个避雷参考！ 无条带 1.蛋白表达量低：充分了解研究的蛋白，表达量低适当增加上样量，20-50μg。 2.本底表达还是诱导表达，非特异性条带。 3.样本提取蛋白使用蛋白酶抑制剂，磷酸酶抑制剂，并设置对照，避免蛋白降解。 4.检查一抗特异性

在动物实验研究中，采血是动物实验中最常用的操作技术之一，经常要采集实验动物的血液进行检测分析。MDL在具体实验过程中，满足“3R”原则的同时，选择对动物的疼痛、组织损伤及压力最小的采血方法，降低实验过程中与压力相关的福利指标，如血清或血浆中的皮质酮水平、血糖值、生长激素或泌乳素、心率、血压以及行为学等，将应激降至最小程度，这既考虑到了动物福利，也获得了良好的科学数据。 一、采血位点有哪些？ 依据采血位点不

一招教会你慢病毒包装 一、实验准备 1、健康的HEK 293T细胞，一般使用复苏后10代以内的细胞进行慢病毒的生产，要求无细菌、真菌以及支原体污染； 2、转染试剂，如PEI、Higene、lipo2000或lipo3000 各种转染试剂的步骤稍有差别，小助手以PEI为转染试剂。 3、DMEM无血清无双抗培养基、DMEM完全培养基（10%FBS和1%P/S）； 4、10mL无菌注射器(环氧乙烷灭菌处理)； 5、0.45μm的细菌滤器。 二、包装步骤 Day1（7:00 PM）铺板HEK 293T细胞 数量：400万/10 cm dish ；觉得计数麻烦

动物行为学是一门专门研究动物行为的学科。它涵盖了动物的沟通、情绪表达、社交、学习、繁殖等各种行为。自20世纪60年代起，动物行为学开始受到科学家的广泛关注。随着科学技术的不断发展，动物行为学与其他学科如生理学、遗传学、经济学、心理学、社会学以及进化论等相互关联，其体系逐步完善，已成为目前实验研究中的重要方法之一。 动物行为学实验通过建造模型，改变周围环境形成刺激（如声音、光线、电刺激、药物处理、食物诱导

在 Western Blot 实验中，内参是指用于标准化蛋白质表达水平的参照蛋白。内参通常是一种在细胞中普遍表达且表达水平相对稳定的蛋白质，其表达水平不受实验条件或处理的影响。我们跑Western blot除了想知道目的蛋白在细胞/组织中是否表达，更重要的是想知道表达量的高低。Western blot条带的灰度值能够帮我们判断目的蛋白的表达丰度，但前提是你最初的上样量是一样的，这个上样量指的可不是上样体积，而是你的蛋白浓度。所以我们需要内参来帮我们

细胞系和细胞株的区别 细胞系和细胞株是细胞生物学中常用的两个概念，它们在研究细胞的生理、生化、遗传和分子生物学等方面起到了重要的作用。尽管两者相似，但实际上有明显的区别。 我们先来看看细胞系（cell line）的定义。细胞系是指从原始组织或细胞中通过培养和传代培养等方法获得的由同一种细胞组成的细胞群体。简单来说，细胞系是通过将原始细胞进行一系列培养和传代培养过程，使其能够持续增殖并具有某些特定的性质或表达某些

动物实验设计应遵循实行“3R原则”，包括实验动物的替代、减少和优化原则，其中减少即指尽量减少实验动物的数量。查阅文献，并未发现对实验动物数目有绝对要求，但在减少的同时，一定要满足统计学要求。统计学上要求一般至少每组有6个可用数据，才有意义。 一般小鼠的每组一般不少于10只； 一般大鼠每组不少于6只； 大动物等级越高，价格越贵，根据情况可适当减少，但一般不能少于4-5只。 作为实验设计者，我们不仅仅知其然，也要知其

化学试剂不像食品和药品有严格的保质期，化学试剂一般没有保质期的具体要求和界限，这与化学试剂的保质期受多方面因素影响有关；要根据化学性质、保存条件等，再结合工作的实际情况判断试剂是否出现变质、能否继续使用。 试剂的有效日期是影响实验结果准确性的重要因素。在实际使用过程中，人们总是习惯于用生产日期来判断化学试剂的有效性，其实这是不对的。那么，应该如何确定化学试剂的保质期呢？化学试剂的保质期都和哪些因素

干货分享 | PAS染色 一、简介 PAS（Periodic Acid-Schiff stain）染色又称过碘酸雪夫染色，糖原染色。一般用来显示糖元和其它多糖物质，还可以观察肾小球基底膜、结肠杯状细胞中性黏液物质、阿米巴滋养体和霉菌的着色。其原理是过碘酸能使细胞内的多糖乙二醇基氧化成二醛，再与Schiff氏液的无色品红结合，红色，定位于胞浆上。 二、染色流程 1. 切片常规脱蜡至水； 2. 蒸馏水洗1-2min； 3. 高碘酸溶液氧化10min； 4. 蒸馏水洗，甩去多余水分； 5. 雪夫（schiff

动物实验｜小鼠眼球取血的实验步骤 小鼠眼球取血的实验步骤： 单手保定好小鼠； 必要时剪掉小鼠胡须，防止污染血液； 轻压取血侧眼部皮肤，使眼球充血突出； 用弯头镊夹取眼球并快速在摘取； 同时用左手中指轻按小鼠心脏部位，以加快心脏泵血速度； 当血液流尽时，用脱臼法处死小鼠； 注意事项： 固定小鼠很关键，若未固定好使小鼠头部摇动会损失很多宝贵的血液。 挤压心脏时，用力要适度，若用力过度不仅会造成动物中途死亡，使采血

大鼠胃的药物吸收测定 目的和原理 尽管胃不是药物的主要吸收场所，还是有某些由胃粘膜吸收的报道，用大鼠胃瘘技术直接测定胃的药物吸收。 操作步骤 雄性 wistar大鼠，体重220~300g，50mg/kg戊巴比妥i.p.麻醉，颈静脉插管，用以给予肝素化盐水(3000IU/kg)和实验过程中替换全血。实验前立即从肝素化供血大鼠采集替换血。在颈动脉作另一插管，用以收集循环血液样品。上腹部正中切口，注意结扎止血，用丝线结扎右侧胃网膜动静脉分支，然后用丝线结扎

提取的核酸用哪个观测指标？ 提取完DNA或RNA之后，通常需要测浓度，这也是质检的主要方法。在分光光度计上进行的吸光度测量包括样品中在不同波长处吸收的所有分子的吸光度。由于核苷酸、RNA、单链DNA和双链DNA都在260 nm处吸收，因此它们将检测样品的总吸光度。观测指标也就是260/280 and 260/230 Ratios，所以下面分别介绍： 260/280 Ratio 260 nm和280 nm处的吸光度比用于评估DNA和RNA的纯度。通常认为~1.8的比例是DNA的“纯”比例；一般认为~2.0的比率为RNA的“

糖尿病神经病变小鼠模型 糖尿病（Diabetes Mellitus，DM）是一种严重威胁人类健康的慢性疾病，该疾病本身对机体的损伤有限，其众多的并发症是人类健康的主要威胁，严重影响患者的生存质量，甚至危及患者生命。糖尿病周围神经病变（Peripheral Diabetes Neuropathy，PDN）是糖尿病的主要并发症之一，发病率（60-70%）高，对患者的损伤大，临床以对称性麻木、电击样疼痛、腹胀、汗出等表现为主，特别是持续性蚁（虫）爬状麻木和电击样疼痛严重影响患者的

糖尿病（Diabetes Mellitus，DM）是一种严重威胁人类健康的慢性疾病，该疾病本身对机体的损伤有限，其众多的并发症是人类健康的主要威胁，严重影响患者的生存质量，甚至危及患者生命。糖尿病周围神经病变（Peripheral Diabetes Neuropathy，PDN）是糖尿病的主要并发症之一，发病率（60-70%）高，对患者的损伤大，临床以对称性麻木、电击样疼痛、腹胀、汗出等表现为主，特别是持续性蚁（虫）爬状麻木和电击样疼痛严重影响患者的生存质量，后果极其严重

蛋白实验 | 免疫共沉淀 免疫共沉淀（Co-Immunoprecipitation，Co-IP）是一种利用抗原与抗体之间的专一性为基础，广泛应用于研究蛋白质与蛋白质相互作用的经典研究方法。 原理 如果细胞内两蛋白（A、B）有直接或间接的相互作用时，那么在温和的裂解条件下获得的蛋白样品中加入 A 蛋白的抗体将A蛋白沉淀下来，在细胞内与A蛋白直接相互作用的B蛋白或与其间接相互作用的C蛋白能一起被沉淀下来。使用western blot检测沉淀中是否存在B或C蛋白来确定B或C蛋白

液氮罐的定义 采用真空绝热保温技术制作的容器，放液氮于其中，利用液氮常压下沸点-196℃的原理，实现生物样本长时间低温保存的设备。 液氮罐的分类 根据液氮罐的不同指标，液氮罐有不同的分类。 按用途分 按用途分，可以分为液氮存储罐和液氮运输罐两种。其中液氮存储罐适合于不同容量长时间的稳定存储，罐体不能用来运输，运输存在安全隐患。液氮运输罐具有体积小和减震结构设计，适用于少量样本的转移存储和短距离运输使用。 按液

1. 分子杂交与印迹技术 （1）探针是经过特殊标记，能与待测单链核酸分子互补结合的已知核酸片段 （2）印迹是将电泳分离后的大分子转印到硝酸纤维素膜上，以便杂交的技术 （3）DNA印迹：Southern blotting，用于检测基因组DNA （4）RNA印迹：Northern blotting，主要用来检测mRNA的表达水平 （5）蛋白质印迹：Western blotting，用于检测蛋白质的水平 2. PCR技术 （1）反应体系：单链DNA模板、特异性DNA引物、耐热DNA聚合酶（Taq DNA聚合酶）、dNTPs底物、含Mg2+的缓冲液

大神吗，你们手里有没有中心静脉置管压力传感器的动物实验文献呀，万分感谢！

动物模型 | 椎间盘退变动物模型 腰椎间盘突出症（lumbar disc herniation，LDH）已成为我国临床常见多发疾病之一。目前认为LDH基本病理改变为椎间盘的退变，然而椎间盘退行性变（intervertebral disc degeneration，IDD）的主要病因和其发病机制尚未明确，也无适宜的治疗措施。动物模型研究是应用于生物医学科技研究中的一种重要工具，针对特定疾病设计对应的动物模型，通过动物模型进行研究动物发病机制与检测验证诊断治疗的有效性，在临床研究中具有无

提到标准品和对照品，也许还有很多小伙伴并没有真正了解两者的含义和区别，更不能在工作中将两者良好的运用，今天小析姐就汇总了我们工作常见的但是又存在误区的词，这就一定不能漏掉标准品和对照品了，快来看看吧。 1、标准品 对照品与标准品是2个不同的概念，中国药典凡例中已有明确的定义： 对照品系指用于鉴别、检查、含量测定和校正检定仪器性能的标准物质，而标准品系指用于生物检定、抗生素或生物药品中含量或效价测定的标准

手把手带你了解脊髓损伤动物模型 脊髓损伤（spinal cord injury，SCI）是由于椎体的移位或碎骨片突出于椎管内造成脊髓或马尾神经不同程度的损伤，是一种致残致死率较高的中枢神经系统性损伤，能够导致不同程度的肢体瘫痪、感觉或自主功能丧失等一系列的并发症。 关于脊髓损伤的治疗，目前尚缺乏明确有效的手段。原因是，脊髓损伤后的病理生理变化机制十分复杂，目前尚未能对其进行全面、深入的了解及认识。 建立可靠性高、重复性好的动物模