1、引物最好在模板cDNA 的保守区内设计 DNA序列的保守区是通过物种间相似序列的比较确定的。在NCBI上搜索不同物种的同一基因，通过序列分析软件（比如DNAman）比对（Alignment），各基因相同的序列就是该基因的保守区。 2、引物长度一般在15~30 碱基之间 引物长度（primer length）常用的是18-27 bp，但不应大于38，因为过长会导致其延伸温度大于74℃，不适于Taq DNA 聚合酶进行反应。 3、引物GC 含量在40%~60%之间， Tm 值最好接近72℃ GC含量（composition）过高或

有人会修7500吗

PCR反应的特点是具有较大扩增能力与灵敏性，但令人头痛的问题是易污染，极其微量的污染即可造成假阳性的产生。 1、污染原因 1、标本间交叉污染:标本污染主要有收集标本的容器被污染，或标本放置时，由于密封不严溢于容器外，或容器外粘有标本而造成相互间交叉污染;标本核酸模板在提取过程中，由于吸样枪污染导致标本间污染;有些微生物标本尤其是病毒可随气溶胶或形成气溶胶而扩散，导致彼此间的污染。 2、PCR试剂的污染: 主要是由于在PCR

PCR反应的特点是具有较大扩增能力与灵敏性，但令人头痛的问题是易污染，极其微量的污染即可造成假阳性的产生。 1、污染原因 1、标本间交叉污染:标本污染主要有收集标本的容器被污染，或标本放置时，由于密封不严溢于容器外，或容器外粘有标本而造成相互间交叉污染;标本核酸模板在提取过程中，由于吸样枪污染导致标本间污染;有些微生物标本尤其是病毒可随气溶胶或形成气溶胶而扩散，导致彼此间的污染。 2、PCR试剂的污染: 主要是由于在PCR

在学习过程中，我们经常会遇到各种PCR字眼，什么qPCR、RT-PCR、RT-qPCR、Real-Time PCR，你了解PCR这个大家族吗？还在傻傻分不清吗？ 一、什么是PCR？ PCR是聚合酶链式反应（Polymerase Chain Reaction）的简称，是一种体外扩增特定DNA片段的分子生物学技术。PCR技术自问世以来，在生物科学领域、分子诊断领域、亲子鉴定、法医鉴定以及犯罪调查等方面发挥了巨大作用，是迄今为止最为重要的技术之一。经过演化和革新，PCR技术已经发展了三代：普通PCR技术、实时

今天，我们聊一聊dPCR技术，首先，我们先了解下什么是dPCR？ dPCR：数字PCR（Digital PCR，dPCR），通过将待测样本进行极限稀释，使每个反应室中平均只有一个拷贝或者没有目标DNA分子，然后加入荧光信号进行PCR扩增，可以检测到低至一个拷贝的突变。 dPCR检测原理：数字PCR是一种核酸检测和绝对定量的新方法。同传统PCR以及qPCR相比，数字PCR增加了一步分液(partitioning)的操作，将几十微升的已经配好的包含有引物、模板、buffer、酶等组分的PCR反应体系分隔

被河北京师众晟欺骗的小伙伴们私信我

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提到标准品和对照品，也许还有很多小伙伴并没有真正了解两者的含义和区别，更不能在工作中将两者良好的运用，今天小析姐就汇总了我们工作常见的但是又存在误区的词，这就一定不能漏掉标准品和对照品了，快来看看吧。 1、标准品 对照品与标准品是2个不同的概念，中国药典凡例中已有明确的定义： 对照品系指用于鉴别、检查、含量测定和校正检定仪器性能的标准物质，而标准品系指用于生物检定、抗生素或生物药品中含量或效价测定的标准

Ct值是什么？ qPCR扩增过程中，扩增产物的荧光信号达到设定的荧光阈值时的所对应的扩增循环数（Cycle Threshold）。C代表Cycle，T代表Threshold。简单讲，Ct值就是qPCR中起始模板扩增达到一定产物量时，所对应的循环数。所谓“一定产物量”后续作进一步解释。 Ct值有什么作用？ 1.指数扩增、模板量与Ct值的关系 理想情况下，qPCR中的基因经过一定的循环数被指数扩增而积累，扩增循环数和产物量之间的关系是：扩增产物量=起始模板量×（1+En）循环个数。

提到标准品和对照品，也许还有很多小伙伴并没有真正了解两者的含义和区别，更不能在工作中将两者良好的运用，今天小析姐就汇总了我们工作常见的但是又存在误区的词，这就一定不能漏掉标准品和对照品了，快来看看吧。 1、标准品 对照品与标准品是2个不同的概念，中国药典凡例中已有明确的定义： 对照品系指用于鉴别、检查、含量测定和校正检定仪器性能的标准物质，而标准品系指用于生物检定、抗生素或生物药品中含量或效价测定的标准

PCR反应的特点是具有较大扩增能力与灵敏性，但令人头痛的问题是易污染，极其微量的污染即可造成假阳性的产生。 1、污染原因 1、标本间交叉污染:标本污染主要有收集标本的容器被污染，或标本放置时，由于密封不严溢于容器外，或容器外粘有标本而造成相互间交叉污染;标本核酸模板在提取过程中，由于吸样枪污染导致标本间污染;有些微生物标本尤其是病毒可随气溶胶或形成气溶胶而扩散，导致彼此间的污染。 2、PCR试剂的污染: 主要是由于在PCR

私我拉群，pz公司，发贴怎么老沉[图片]

有没有懂哥

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试剂：氯仿，异丙醇，75℅乙醇，无RNase的水或0.5℅SDS（溶液均需用DEPC处理过的水配制）。 操作步骤：匀浆处理 a、植物组织 以叶片RNA提取为例.取新鲜叶片在液氮中充分研磨或将叶片剪碎后直接在Trizol中研磨,研磨要迅速,最好不要超过1min.，大约100mg 叶片使用1 ml Trizol。 b、动物组织 以鼠肝脏RNA提取为例.取新鲜或-70℃冻存组织,每50-100mg组织加1ml Trizol,用匀浆仪进行匀浆处理.样品体积一般不要超过Trizol体积的10%。 c、单层培养细胞 直接在培养板中加入Triz

PCR产物跑胶后测序老是有点突变怎么办？提高些温度能行吗？

如图 第一次遇到这种奇怪的曲线 请问各位大佬是什么原因形成的呢

求助，荧光定量中标准品Ct值波动太大，4个标准品，S1定量时每次实验的Ct值会有差别，S2.3.4每次的Ct值都比较稳定，想问问这种情况下，不改变反应体系用量，增加S1的加样量可以降低Ct值吗？目前是每孔2μl标准品+18μl反应体系，如果换成2.3μl标准品+18μl反应体系，可否降低S1的Ct值？

新手求助

有大佬知道可以批量设计kasp引物的软件或者网站么，本人做小麦的，用过poly Marker，但是返回的引物都是非特异的，引物设计效率很低。

1、PCR PCR（Polymerase Chain Reaction）即聚合酶链式反应，是指在DNA聚合酶催化下，以母链DNA为模板，以特定引物为延伸起点，体系中加入dNTP、Mg2+以及延伸因子、扩增增强因子，通过变性、退火、延伸等步骤，体外复制出与母链模板DNA互补的子链DNA的过程，能快速特异地在体外扩增任何目的DNA。 2、热启动PCR 常规PCR的扩增开始时间并不是放进PCR仪，运转程序才开始扩增。当体系配置完成的时候，扩增就开始了，这可能会引起非特异性扩增出现，热启动PCR可

五月份报的名，然后一直拖着不给办钱也不退.应该不只我一个吧 有的话就都加一下微信建个群。人多了好办事

#pcr##“三阳”来了？##新冠##cov###covid#

核酸（" RNA ")，适合用于多重 RT - PCR 协议检测 人类呼吸道病原体（如甲型流感病毒、乙型流感病毒、丙型流感病毒）病毒 FLUAH1,FLUAH3，腺病毒，副流感1病毒，副流感2病毒，副流感3型病毒副流感4型病毒呼吸道合胞病毒人类 偏肺病毒， SARS - CoV -2及其变种） ⭕️ 美国临床报告显示，#百泰克 各项指标都是第一，优于雅培，西门子，BD等国外大牌有FDA CE，#无锡百泰克 Bioteke VX:litingxxzj Including 2019-nCoV， influenza A virus，influenza B virus，respiratory syncytial

因为在做重复，做到第三次之后，怎么p都是这种拖带，反应体系和条件都和之前一样，rna也重新提过。连阴性对照都拖带…

别报，深坑

lomai688

(1)膜没有完全均匀湿透 使用100% methanol浸透膜。 (2)靶蛋白分子量小于10 000 选择小孔径的膜，缩短转移时间。 (3)靶蛋白等电点等于或接近转移缓冲液pH值 可尝试使用其他缓冲液如CAPS缓冲液（pH 10.5)或使用低pH值缓冲液如乙酸缓冲液。 (4)甲醇浓度过高 过高甲醇浓度会导致蛋白质与SDS分离，从而沉淀在凝胶中，同时会使凝胶收缩或变硬，从而抑制高分子量蛋白的转移。降低甲醇浓度或者使用乙醇或异丙醇代替。 (5)转移时间不够 对于厚的胶以及高分子量蛋

　PCR实验室根据使用仪器的功能合理设置各个工作区域，如采用聚合酶联反应：则设置试剂储存和准备区、标本制备区、扩增区、扩增产物分析区四个单独的工作区域，这是最常用的分区方式。样品需要粉碎处理的，还需增设样品粉碎区。若使用实时荧光PCR法：基因扩增区、基因产物分析区可以合并在一个房间内；采用标本处理、核酸提取及扩增检测为一体的全自动化PCR分析仪，则标本制备区、扩增区、扩增产物分析区可合并为一个区域，因此PCR实验

迷茫，想做个超表达载体，引物40bp，有一半是同源臂，结果目的基因扩增不出来了怎么办？

你们都花高价买，我是当初报名自己考的白嫖的，疫情结束了，这证还有毛用，

临床基因扩增实验室检验员和负责人各一人。 要求两年以上工作经验， 临床基因扩增实验室技术人员培训合格证+新冠肺炎核酸检测培训合格证。 大型药企职工医院正式岗位，五险一金+周末双休

收一个安徽账号有的来

联系方式：15063354994（微信同号） 持正检测（山东）有限公司（简称“持正检测”）是经山东省质量技术监督局审查认可，取得计量认证合格证书（CMA认证）的权的第三方检测机构。 公司面向范围内的： 1、检验设备（生物安全柜、洁净工作台、医用洁净工作台、层流、隔离设备过滤器检漏等） 2、医疗机构（包括医院手术室、静配中心、洁净病房、医院空气净化、隔离病房等） 3、医药工业（包括药品生产企业、医疗器械生产企业、生产企业、制药

3周培训时间 下证入国家临检资源库 略贵，贪便宜勿扰

为啥没官网的报名渠道，全都是中介，中介百分之99都是骗子，别被骗了

卡折了快要断了，我自己买了pr532把卡写到手环内了 去食堂发现可以用，并且数据写在卡内（手环和实卡是分开计算扣钱的，已经实测） 图一是数据 数据a是使用后读出，数据b是我提前备份的 图二是消费与剩余 请求大佬帮我分析数据具体是哪一块，再就是这卡后台看得到不

北京啸升科技，是骗子么？大家有在这下过证的么？求指路！！

这里面统一回复一下，证书电子照片已经拿到了，纸质的还没拿到，它们官网上目前还查不到证书，目前我所在的单位在上海，认可这个证书，有的单位只认临检中心的证，所以自己甄别，只能说，不是假的

#被骗##人民日报#

证下不来了，大家联系我一起解决吧

城市：全国一二三线城市，深圳，广州，上海，北京，南京，天津，武汉，重庆，成都

吉林省的PCR上岗证怎么考呀？有没有人能进去吉林省临床检验中心官网呀？

脑胶质瘤动物模型 【造模机制】胶质瘤是一种常见的颅内恶性肿瘤,建立成熟的胶质瘤动物模型,进一步了解和研究胶质瘤的发病机制及治疗方法是有很必要的。立体定向建立大鼠胶质瘤模型国内外报道较多,但接种体积及接种量报道不一。9L/Fuscher344与C6/Wistar是两种最常用的大鼠脑胶质瘤模型,广泛应用于脑胶质瘤治疗的实验研究。C6、9L细胞均是由化学致癌剂诱发大鼠产生的脑胶质瘤细胞。能为胶质瘤的研究提供可靠的动物模型。 【造模方法】先行麻醉

SCID 鼠人宫颈癌动物模型 【造模机制】宫颈癌是一种常见的恶性妇科疾病,其与人类乳头瘤病毒(HPV)感染密切相关。大量的研究结果证实,人宫颈鳞状细胞癌组织在 SCID鼠体内移植成功后,能继续保持其移植前细胞形态学、组织学特征及表达HPV的能力。并且荷瘤鼠成瘤后生长速度开始变得较为缓慢,初期为乳头状突起,以后呈膨胀性生长,原位移植瘤含有丰富的血管。其他脏器一般不发生远处转移,其生物学特征接近人自发宫颈癌。 【造模方法】在无菌条件下,