内参，顾名思义，就是内部参照。它在 Western Blot 实验中起到了重要的作用，用于校正蛋白质样本的加载量差异和检测系统的误差。就像是一把尺子，可以让我们在比较不同样本之间的蛋白质表达时有一个基准。 那么，如何选择内参呢？一般来说，我们需要考虑以下几个因素： 1、蛋白表达丰度：内参应该在样本中稳定表达，且表达量相对较高，这样才能有效地检测到内参信号。 2、分子量：内参的分子量应该与目标蛋白的分子量有明显差异，以便在

一、原理： Cell Counting Kit-8（简称CCK-8）试剂含有WST-8，它在电子载体（1-Methoxy PMS）的作用下被细胞线粒体中的脱氢酶还原为具有高度水溶性的黄色甲瓒产物（Formazan dye）。生成的甲瓒物的数量与活细胞的数量成正比，因此可利用这一特性直接进行细胞增殖和毒性分析。 CCK-8法因其高灵敏度，无放射性的比色检测法的优点，可替代传统的MTT法。 二、检测步骤： 向96孔的各孔中加入100μl细胞悬液。 使用适当的培养基制备50,000-100,000个/ml的细胞悬液。 在37

活性氧（ROS）的流式检测通常是通过使用荧光探针如DCFH-DA来监测细胞内活性氧水平的变化。以下是该检测方法的一些关键步骤和原理： 01选择荧光探针常用的荧光染料是DCFH-DA，它能够进入细胞并在细胞内被酯酶水解成DCFH。DCFH随后可以被细胞内的活性氧氧化，生成发荧光的DCF。 02DCFH-DA是一种用于检测活性氧ROS的荧光探针，全称为2,7-二氯荧光素二乙酸酯。其工作原理为：DCFH-DA本身没有荧光，但可以自由穿过细胞膜，一旦进入细胞，它会被细胞内的酯

在学习过程中，我们经常会遇到各种PCR字眼，什么qPCR、RT-PCR、RT-qPCR、Real-Time PCR，你了解PCR这个大家族吗？还在傻傻分不清吗？ 一、什么是PCR？ PCR是聚合酶链式反应（Polymerase Chain Reaction）的简称，是一种体外扩增特定DNA片段的分子生物学技术。PCR技术自问世以来，在生物科学领域、分子诊断领域、亲子鉴定、法医鉴定以及犯罪调查等方面发挥了巨大作用，是迄今为止最为重要的技术之一。经过演化和革新，PCR技术已经发展了三代：普通PCR技术、实时

提到标准品和对照品，也许还有很多小伙伴并没有真正了解两者的含义和区别，更不能在工作中将两者良好的运用，今天小析姐就汇总了我们工作常见的但是又存在误区的词，这就一定不能漏掉标准品和对照品了，快来看看吧。 1、标准品 对照品与标准品是2个不同的概念，中国药典凡例中已有明确的定义： 对照品系指用于鉴别、检查、含量测定和校正检定仪器性能的标准物质，而标准品系指用于生物检定、抗生素或生物药品中含量或效价测定的标准

细胞培养是指从体内组织取出细胞在体外模拟体内环境下，使其生长繁殖，并维持其结构和功能的一种培养技术。细胞培养的培养物可以是单个细胞，也可以是细胞系。细胞复苏是细胞培养的重要环节，下面小编具体给大家介绍下细胞复苏的protocal和注意事项！ 01、细胞复苏的原理 细胞复苏是指将冻存在液氮或者-70℃冰箱中的细胞解冻之后重新培养，细胞恢复生长的过程。当恢复到常温状态时，细胞的形态结构保持正常，生化反即刻恢复。细胞复苏

淋巴细胞和NK细胞的生成 Lymphocyte and NK Cell Production CLP被认为能产生B淋巴细胞、T淋巴细胞和NK细胞。骨髓中B淋巴细胞和T淋巴细胞祖细胞的发育与抗原无关。SCF和Flt3L似乎都参与了小鼠早期淋巴系祖细胞的生成。 The CLP is believed to give rise to B lymphocytes, T lymphocytes, and NK cells.16 The development of B lymphocyte and T lymphocyte progenitors in bone marrow is antigenindependent. Both SCF and Flt3L appear to be involved in the production of early lymphoid progenitor cells in mice. B淋巴细胞祖细胞在大多数哺

目的和原理 尽管胃不是药物的主要吸收场所，还是有某些由胃粘膜吸收的报道，用大鼠胃瘘技术直接测定胃的药物吸收。 操作步骤 雄性 wistar大鼠，体重220~300g，50mg/kg戊巴比妥i.p.麻醉，颈静脉插管，用以给予肝素化盐水(3000IU/kg)和实验过程中替换全血。实验前立即从肝素化供血大鼠采集替换血。在颈动脉作另一插管，用以收集循环血液样品。上腹部正中切口，注意结扎止血，用丝线结扎右侧胃网膜动静脉分支，然后用丝线结扎胃和左肝小叶后韧带，

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随着我国老龄化社会的形成，心脑血管疾患逐渐成为严重影响人们生命健康的最主要疾病。心肌缺血将导致心肌细胞不可逆性坏死，被称为心肌梗死。作为终末分化细胞，大面积心肌细胞梗死将导致严重心脏功能不全危及患者生命及时恢复缺血心肌组织的血液灌注一“再灌注”是治疗急性心肌梗死唯一有效的方法。然而，当缺血心肌再次获得血液灌注后将导致比同时间单纯缺血更加严重的心肌损害，这一矛盾的现象被称为再灌注损伤。心肌缺血再灌注

非酒精性脂肪性肝病（non-alcoholic fatty liver disease，NAFLD）是一种无酒精滥用的肝病综合征，包括单纯性脂肪肝、脂肪性肝炎、脂肪性肝纤维化和肝硬变。可从单纯性脂肪肝经非酒精性脂肪性肝炎（NASH）发展为肝纤维化，甚至导致肝硬化、肝细胞癌（HCC）或肝功能衰竭等终末期肝病。 一、模型动物的选择 常用的实验动物有大鼠、小鼠、家兔等，其中大鼠和小鼠的应用最为广泛，大鼠以 Wistar 和 Sprague Dawley（SD）为代表；小鼠的品系则更加多样，其中C57BL/

心肌梗死是一种严重的心血管疾病，由于冠状动脉血供急剧减少或中断，使心肌持续性缺血缺氧以致坏死，损害心功能且可能导致心律失常、休克以及心力衰竭等严重后果，已成为威胁人类生命健康的重大疾病之一。 目前建立心肌梗死动物模型的方法有多种，包括：冠脉结扎法、药物法、球囊堵闭法、栓塞法以及血栓形成法等。今天小助手根据粉丝们的后台留言，今天输出冠脉结扎法的实操步骤。 一、首先认识心脏的结构 冠状动脉结扎法操作简单、

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实验步骤 1、吸去旧培养液。 2、PBS冲洗3次，每次2ml。 3、吸去PBS，胰酶1.5ml，放入孵育箱，消化4min后取出观察细胞悬浮情况。 4、3ml培液中止消化，轻轻吹打至底壁透光，制成细胞悬液。 5、吸入15ml离心管中，1000r/5min离心。 6、吸去上清，加入1ml冻存液（冻存液配制方法：DMSO和血清按1:9配制成10ml,离心管外面裹一层铝箔避光，放入4度冰箱保存），吹打均匀，吸入冻存管中。 7、放入梯度降温盒，-80℃冰箱过夜。 8、24h后从梯度盒取出冻存管，放入液氮

非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）是一种以肝细胞脂肪堆积为特征的疾病，也是人类最常见的慢性肝脏疾病。据统计，罹患 NAFLD 的人数约占全球总人口的四分之一，而中国的患病率已超过29%，并且呈发展状态。NAFLD 的发病机制复杂，脂肪组织炎症和肠道微生物及其代谢物是关键环节；另外，与胃肠道炎症相关的饮食、环境和遗传因素在发病过程起到的作用也被逐渐重视。小编从模型动物的选择、动物模型的建立角度出发，阐述不同动物和方法的优缺点及特

在动物实验研究中，采血是动物实验中最常用的操作技术之一，经常要采集实验动物的血液进行检测分析。MDL在具体实验过程中，满足“3R”原则的同时，选择对动物的疼痛、组织损伤及压力最小的采血方法，降低实验过程中与压力相关的福利指标，如血清或血浆中的皮质酮水平、血糖值、生长激素或泌乳素、心率、血压以及行为学等，将应激降至最小程度，这既考虑到了动物福利，也获得了良好的科学数据。 一、采血位点有哪些？ 依据采血位点不

在动物实验研究中，采血是动物实验中最常用的操作技术之一，经常要采集实验动物的血液进行检测分析。MDL在具体实验过程中，满足“3R”原则的同时，选择对动物的疼痛、组织损伤及压力最小的采血方法，降低实验过程中与压力相关的福利指标，如血清或血浆中的皮质酮水平、血糖值、生长激素或泌乳素、心率、血压以及行为学等，将应激降至最小程度，这既考虑到了动物福利，也获得了良好的科学数据。 一、采血位点有哪些？ 依据采血位点不

1、转膜不充分 (1)膜没有完全均匀湿透 使用100% methanol浸透膜。 (2)靶蛋白分子量小于10 000 选择小孔径的膜，缩短转移时间。 (3)靶蛋白等电点等于或接近转移缓冲液pH值 可尝试使用其他缓冲液如CAPS缓冲液（pH 10.5)或使用低pH值缓冲液如乙酸缓冲液。 (4)甲醇浓度过高 过高甲醇浓度会导致蛋白质与SDS分离，从而沉淀在凝胶中，同时会使凝胶收缩或变硬，从而抑制高分子量蛋白的转移。降低甲醇浓度或者使用乙醇或异丙醇代替。 (5)转移时间不够 对于厚的胶

贴壁细胞在培养时要贴附于培养（瓶）器皿壁上，细胞一经贴壁就迅速铺展，然后开始有丝分裂，并很快进入对数生长期。贴壁细胞因其培养过程较为繁琐，所以培养时更容易出现问题。小助手总结了贴壁细胞培养中常见的5种问题，并详细介绍原因和解决方法，若培养时遇到这些情况，可参考对应解决方法处理。 一、贴壁细胞培养，细胞不贴壁 常见原因：胰蛋白酶消化过度；支原体污染；培养基pH值过碱（NaHCO3分解）；细胞老化；接种细胞起始浓度

养细胞真是一件特别心累的事，不知不觉间可能就会出现很多问题，细胞不长了、不贴壁了...... 实在让人操碎了心。 培养细胞不贴壁 可能原因 1.胰蛋白酶消化过度； 2.支原体污染； 3.培养基pH值过碱（NaHCO3分解）； 4.细胞老化； 5.接种细胞起始浓度太低或太高。 解决方法 1.缩短胰蛋白酶消化时间或降低胰蛋白酶浓度； 2.分离培养物，检测支原体。清洁支架或培养箱。如发现支原体污染，丢弃培养物； 3.使用无菌醋酸溶液调整pH值或充入无菌CO2； 4.启

今天给大家讲解一篇线粒体代谢相关机制的文章。简言之，mTOR是结核病的早期宿主抵抗因子，可通过增加糖酵解，促进的线粒体能量代谢，来防止线粒体损伤而保护巨噬细胞。接下来，我们一起来看看具体内容吧。 2022年8月18日，由剑桥大学医学系的Lalita Ramakrishnan领衔的团队，在Cell期刊上发表了题为mTOR-regulated mitochondrial metabolism limits mycobacterium-induced cytotoxicity的研究性论文，通过斑马鱼正向遗传筛选，确定了mTOR激酶——一种代谢的主要调节因子，作

在细胞培养过程中，内毒素是一个不容忽视的问题。内毒素主要来源于革兰氏阴性细菌的细胞壁，如大肠杆菌、绿脓杆菌等。在细胞培养过程中，如果使用了含有内毒素的试剂或介质，可能会对细胞生长和分化产生负面影响，甚至导致实验失败。内毒素的特点是在其产生的量相对较少时，对宿主细胞没有直接的毒性作用，而是通过诱导炎症反应间接产生各种生物学效应。虽然内毒素的毒性作用相对较弱，但在细胞培养中，其影响却不容忽视。 内毒素

一.细胞复苏 1、提前准备完全培养基并预热至37℃（可以放至在水浴或培养箱中进行预热，需要多少预热多少，反复预热会导致培养基失活）；用清洗洁净的烧杯或其他合适容器装有适量超纯水，然后放入37-38℃水浴锅中预热至37℃（至少需30min）；把所需耗材和其他物品放置于超净工作台中紫外照射灭菌； 2、提前查询所取冻存管的存放位置，把整个存储架子提起，为了降低复温对其它细胞的影响，可把该存储架子放置于装有液氮的泡沫盒中，快速（

相当多的蛋白质行使功能的时候并不是单打独斗的，蛋白质们通过蛋白质相互作用形成复合体然后进行工作。因此，研究蛋白质的相互作用成为研究蛋白质功能和作用机制的最为重要的环节之一。 研究蛋白互作的方法有很多，今天小编就几种常用的方法做个简单的概述，希望能够帮助到大家。 1、酵母双杂交系统 原理：很多真核生物的位点特异转录激活因子通常具有两个可分割开的结构域，即DNA特异结合域（DNA-binding domain, BD）与转录激活域（Transcript

紫外分光光度法是根据物质的吸收光谱，来研究物质的成分、结构和物质间相互作用的有效手段。紫外分光光度计可以在紫外可见光区任意选择不同波长的光。紫外分光光度计的使用及校准需要注意哪些问题呢？跟小析姐一起来看看吧、 物质的吸收光谱就是物质中的分子和原子吸收了入射光中的某些特定波长的光能量，相应地发生了分子振动能级跃迁和电子能级跃迁的结果。 由于各种物质具有各自不同的分子、原子和不同的分子空间结构，其吸收光

抑菌圈法是衡量杀菌防霉剂效果的一种方式，主要用于测定杀菌防霉剂对细菌、霉菌、酵母菌的抑菌作用，是定性或半定量的方法。通过杀菌防霉剂在琼脂平板上的扩散能力来初步筛选更有效的杀菌防霉剂品种。 用具和材料 霉菌培养皿，无菌吸管（或针筒），圆片滤纸（直径2cm），带玻璃珠的无菌水，带过滤漏斗的三角牌，镊子，接种针（环），熔化状态的琼脂培养基（最好保温于45℃左右水浴中），一定浓度的药剂，供试验用的菌种。 试验过程 用

什么是信号通路？ 信号通路是指当细胞里要发生某种反应时，信号从细胞外到细胞内传递了一种信息，细胞要根据这种信息来做出反应的现象。信号通路（signal pathway）的提出最早可以追溯到1972年，不过那时被称为信号转换（signal transmission）。1980年，M. Rodbell在一篇综述中提到信号转导（signal transduction），此后这个概念就被广泛使用了。信号通路是指能将细胞外的分子信号经细胞膜传入细胞内发挥效应的一系列酶促反应通路。这些细胞外的分子信号

网上很多发言认为：只有120度高温才能杀死红色毛癣菌（足癣菌）， 鄙人特向皮肤科同学请教： 用100度沸水蒸煮15分钟，能杀死红色毛癣菌吗？ 请勿用网上复制的东东回答我， 我只相信医学教材上说的，或者请皮肤科同学帮忙问一问你们的老师，可以吗？ 谢谢。

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查了一下不是985和211，这学校就业如何？什么专业最好呀？

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实验进行不下去了，哭。急需，具体详聊，可交换可有偿。

学长学姐好！协和医科大学向来只在重庆招护理专业，但是我很想学临床。请问学姐学长，校内能转专业吗？请为萌新指路！

我们在学校爸妈不能给我们做饭只能点点外卖吃，也是一笔不小的开销，能省则省，学长这次建了个美团饿了么的领券平台，不用开会员！美团饿了么都能每天免费领红包抵扣的，大家伙每天都可以过来领的。

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